TetR家族转录调控基因tfpA对链霉菌合成A21978C的影响.pdfVIP

334 中国抗生素杂志2015年5月第40卷第5期 文章编号：1001—8689(2015)05—0334—04 TetR家族转录调控基因tfpA对链霉菌合成A21978C的影响 逢丽 ，2 魏维2，3 靳旭2，3 戈梅2，3 陈代杰1， (1华东理工大学，上海来益生物药物研发中心有限责任公司，上海201203； 3上海交通大学药学院，上海200240) 摘要：目的 研究A21978C产生菌中一个TetR家族转录调控基因tfpA对A21978C产量的影响。方法 利用同源重组方法敲 除该tfpA基因，HPLC检测突变株A21978C产量的变化，通过过表达与回补实验验证其调控特性。结果 敲除咖 基因的突变株 A21978C产量与亲株相比增加了50％；基因回补后A21978C产量恢复到亲株的水平。过表达突变株则几乎不产A21978C。结论 TetR家族转录调控基因ftpA对A21978C的合成至关重要，是一个负调控基因。 关键词：A21978C；TeIR家族；转录调控子；基因敲除 中图分类号：093 文献标志码：A InfluenceofTetRfamilytranscripti0nalregulatorygenetfpAonA21978C productioninStreptomycessp． PangLi，一，WeiWei。，JinXu。，GeMei。，andChenDai-jie (1EastChinaUniversityofScienceandTechnology,Shanghai200237；2ShanghaiLaiyiCenterforBiopharmaceuticalRD，Shanghai 201203；3SchoolofPharmacy,ShanghaiJiaoTongUniversiyt,Shanghai200240) Abstract Objeetive TodiscoversomerelationshipsbetweentfpAandthebiosynthesisofA21978Cwhich belongstotheTetR—family,atranscriptionalregulator．Methods ftpAwasdeletedbyhomologousrecombination． andtheproduction OfA21978C inthemutantswasdetectedviaHPLC．Thencomplementationandover-expression wereusedtoconfirm thefunctionOfthisgene．Results Comparedtotheoriginalstrain．productionofA21978C intheAtfpAmutantincreasedobviously．WhiletheO．tfpAmutantlostitsabilitytoproduceA21978C．andC—tfpA mutantwasatasimilarleveltothatoftheoriginalstrain．Conclusion ftpAexertsastronginfluenceonA21978C productionandisanegativeregulatorygene． Keywords A21978C；TetR family；Transcriptionalreug lator；Genedeletion 随着高致病耐药菌的不断出现，临床上对新型 (Streptomycesroseosporus)通过非核糖体蛋 白合成酶 抗生素的需求十分迫切 。达托霉素对包括MRSA、 (NRPS)~导合成 的 【】，我们从链霉菌HCCB10043中 VRE等耐药菌在 内的大多数的革兰阳性菌都有很强