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  • 2016-03-28 发布于湖北
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Southern blot 分子杂交 贾宾 王赛 肖炜恩 查强 Southern分子杂交是核酸杂交的一种 根据核酸变性与复性的特性,特定核苷酸序列的单链DNA或RNA能够在一定条件下与具有互补性的核酸链退火形成双链结构,称之为核酸杂交 将已知的特定核苷酸序列的单链DNA或RNA进行标记,制成核酸探针,就可以用它检测样品中是否存在同源序列,或确定不同物种之间的亲缘关系,已成为分子生物学中一类重要的检测手段 Southern杂交技术(Southern blot)用于检测DNA Southern杂交技术原理 Southern杂交技术是由Edward M. Southern在1975年首先发明的用于检测DNA的一种核酸杂交技术,并因此而得名 根据毛细管作用的原理,将在电泳凝胶中分离的DNA片段转移并结合在适当的滤膜上,然后通过与标记的单链DNA或RNA探针的杂交作用,检测这些被转移的DNA片段。 Southern blot印迹杂交原理示意图 Southern blot技术优点: Southern blot方法十分灵敏,在理想的条件下,用放射性同位素标记的特异性探针和放射自显影技术,即便每条电泳带仅含2ng DNA也能被清晰地检测出来。 注意事项: 1. 膜的大小及预杂交、杂交过程中所用试剂的量可根据需要进行适当调整。 2.将凝胶中和至中性时,要测pH,防止凝胶的碱性破坏硝酸纤维

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