肺脏基质细胞对突状细胞生物学特性的影响.pdfVIP

…IIIII I IIII IIIII I III[I Y1 肺脏基质细胞对树突状细胞生物学特性的影响 研究生：赵 琴 专 业：内科学 导 师：刘焕星 教授 中文摘要 cells，DC)，是体内已知功能最强的专职抗原递呈 树突状细胞(dendritic cells，APC)，是免疫应答的中心环节，不仅能活化初 细胞(antigenpresenting 始T细胞启动免疫应答，还能诱导免疫耐受负向调节免疫，有双重调节免疫 反应维持免疫平衡的作用。DC的最终免疫效应取决于其发育阶段及所处的 免疫微环境。免疫微环境不仅为免疫应答提供反应场所，还通过调控免疫细 胞的分化发育和功能来调节免疫应答。肺脏通过气道与外界相通，每天都要 接触大量外界抗原却能维持免疫平衡，可见肺脏有精确的免疫调控机制，我 们通过实验证实了肺脏基质细胞微环境对免疫细胞DC的分化发育及功能有 调节作用，这与维持免疫平衡有密切关系。 目的 观察小鼠肺脏基质细胞微环境对骨髓来源成熟树突状细胞分化发育及 功能的影响，并探讨其影响机制。 方法 通过小鼠肺脏组织原代培养建立一株成纤维样基质细胞系，并从细胞形 态及波形蛋白表达上给予鉴定，认为原代培养的肺脏基质细胞具备成纤维样 细胞的特点。通过RT-PCR方法检测肺脏基质细胞高分泌两种抑制性细胞因 子：TGF—B、VEGF。此基质细胞培养上清与完全培养基以l：l的比例混合后 用于培养成熟树突状细胞，一周后成熟树突状细胞被诱导成具有独特生物学 特性的调节性树突状细胞(DCreg)。HE染色后观察细胞形态特征，特异性 夹心酶联免疫法检测培养上清细胞因子(IL一1O和IL一1 2p70)的含量，流式 细胞术检测细胞表型表达水平及吞噬能力，MTT法检测DCreg诱导同种异 体T增殖能力。将上述检测结果与成熟树突状细胞进行比较，观察诱导前后 树突状细胞的区别。 结果 调节性树突状细胞(DCreg)分泌的细胞因子IL．10高于成熟树突状细 l 胞组(P0．01)，而IL．1 1)；细胞表型与 2p70的分泌水平低于此组(P0．0 1 成熟树突状细胞比较，CDlb上调(PO．01)，CDll 1)，与成熟DC无显著差异(P Dcreg的吞噬能力较未成熟DC低(尸O．0 0．05)；而其诱导同种异体T增殖能力明显低于成熟DC组(mDC)。 结论 我们首次证实了肺脏基质细胞微环境可诱导成熟树突状细胞分化发育 为另一种生物学特性不同的DC亚群一调节性树突状细胞(DCreg)，其有抑 制同种异体T细胞增殖进而诱导免疫耐受负向调节免疫的作用。明确了解肺 脏的免疫调节机制对预防和治疗呼吸系统的过敏性疾病有很大的帮助。 关键词 肺脏基质细胞；成熟树突状细胞；调节性树突状细胞；免疫耐受 2 OFPULMONARYSTROMAI，CELLSON EFFECTS CHARACTEIUSTICSOFMATUREDENDRITICCELLS Postgraduate：Zhaoqin medicine Speciality：internal Tuor：Prof．Liuhuan