专题基因工程——.pptVIP

限制性内切酶作用过程 2）不属于质粒被选为基因运载体的理由是 A、能复制 B、有多个限制酶切点 C、具有标记基因 D、它是环状DNA D 随堂练习 3）有关基因工程的叙述中，错误的是 A、DNA连接酶将黏性末端的碱基对连接起来 B、 限制性内切酶用于目的基因的获得 C、目的基因须由运载体导入受体细胞 D、 运载体和目的基因用同一种限制酶处理 A 随堂练习 4）有关基因工程的叙述正确的是 A、限制酶只在获得目的基因时才用 B、重组质粒的形成在细胞内完成 C、质粒都可作为运载体 D、蛋白质的结构可为合成目的基因提供资料 D 随堂练习 5）基因工程是在DNA分子水平上进行设计施工的。在基因操作的基本步骤中，不进行碱基互补配对的步骤是 A、人工合成目的基因 B、目的基因与运载体结合 C、将目的基因导入受体细胞 D、目的基因的检测和表达 C 随堂练习 1. 有关基因工程的叙述中，错误的是 A、基因工程技术能定向地改造生物的遗传性状，培育生物新品种 B、重组DNA的形成在细胞内完成 C、目的基因须由运载体导入受体细胞 D、质粒都可作为运载体 随堂练习 BD 2.下列四条DNA分子，彼此间具有粘性末端的一组是 A．①② B．②③ C．③④ D．②④ D 3.在基因工程中，切割运载体和含有目的基因的DNA片段，需使用 A.同种限制酶 B. 两种限制酶 C.同种连接酶 D. 两种连接酶 随堂练习 A 4.不属于质粒被选为基因运载体的理由是 A、能复制 B、有多个限制酶切点 C、具有标记基因 D、它是环状DNA D 细胞的基因结构 原核细胞的基因结构 非编码区 非编码区 编码区 编码区上游 编码区下游 启动子 终止子 与RNA聚合酶结合位点 真核细胞的基因结构 非编码区 非编码区 编码区 编码区上游 编码区下游 启动子 终止子 能够编码蛋白质的序列 不能够编码蛋白质的序列 内含子： 外显子： （二）利用PCR技术扩增目的基因 ① 概念：PCR全称为_______________，是一项 在生物____复制_____________的核酸合成技术 ③条件：____________________、 _______________、___________ (做启动子)、 ___________等 ②原理：__________ ④方式：以_____方式扩增，即____（n为扩增循 环的次数） ⑤结果： 聚合酶链式反应 体外 特定DNA片段 DNA复制 模板DNA 四种脱氧核苷酸 一对引物 DNA聚合酶 指数 2n 使目的基因的片段在短时间内成百万倍地扩增 （二）利用PCR技术扩增目的基因 ⑥过程： a、DNA变性（90℃-95℃）： 目的基因DNA受热变性，解链 b、复性（55℃-65℃）： 引物与单链互补结合 c、延伸（70℃-75℃）： 合成链在DNA聚合酶作用下进行延伸 （二）利用PCR技术扩增目的基因 三、根据已知的氨基酸序列合成DNA法 ： 根据已知蛋白质的氨基酸序列，推测出相应的信使RNA序列，然后按照碱基互补配对原则，推测出它的结构基因的核苷酸序列，再通过化学方法，以单核苷酸为原料合成目的基因。 蛋白质的氨基酸序列 mRNA的核苷酸序列 结构基因的核苷酸序列 推测 推测 目的基因 化学合成 1.用一定的_________切割质粒，使其出现一个切口，露出____________。 2.用_____________切断目的基因，使其产生_________________。 3.将切下的目的基因片段插入质粒的______处，再加入适量_____________，形成了一个重组DNA分子（重组质粒） 限制酶 黏性末端 同一种限制酶 切口 DNA连接酶 相同的黏性末端 二、基因表达载体的构建 质粒 DNA分子 限制酶处理 一个切口 两个黏性末端 两个切口 获得目的基因 DNA连接酶 重组DNA分子（重组质粒） 同一种 4.过程: 二、基因表达载体的构建 5.基因表达载体的组成： 复制原点+目的基因+启动子+终止子+标记基因 二、基因表达载体的构建 基因表达载体的组成： 目的基因、启动子、终止子、标记基因 启动子：一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的首端， 是RNA聚合酶识别和结合的部位。