携带SXTR391家族整合接合元件多重耐药菌株的高效筛选与分析.pdfVIP

※生物工程 良 品科 学 2015。Vo1．36,No．13 79 携带SXT／R391家族整合接合元件多重耐药 菌株的高效筛选与分析 孙凤娇 ，贺 羽，陈兰明 (农业部水产品贮藏保鲜质量安全风险评估重点实验室 (上海)，上海海洋大学食品科学与技术学院，上海 201306) 摘 要 ：本研究建立了一种抗生素平板与分子检测相结合的高效筛选水产品中携带SXT／R391家族整合接合元件 (integrativeandconjugativeelements，ICEs)的多重耐药菌株的方法。采用美国临床与实验室标准研究所标准 Kirby．Bauer纸片扩散法、需氧菌液体微量稀释法，以及接合实验，对筛选、鉴定获得的携带SXT／R391家族ICEs的 变形杆菌 (Proteusvulgam )进行 了抗菌素、重金属抗性以及ICEs元件接合转移活性的分析。结果表明：运用本研究 建立的筛选法可有效获得含有多重耐药基因的ICEs元件，其检出率为3％，远高于常规聚合酶链式反应技术的检测水 平 (l‰)。受试菌株对六大类l0种抗菌素均表现出抗性，并且对重金属镉、铜、锌和汞具有高度耐受性。接合实 验证明了受试菌株所携带的ICEs元件在普通变形杆菌与大肠杆菌 (Escherichiacoli)MG1655之间的自我转移活性。 关键词 ：整合接合元件：SXTR／391家族：多重耐药；重金属抗性 EffectiveScreeningforM ultiple—DrugResistantBacteriaHarboringSXT／R391FamilyofIntegrativeand ConjugativeElements SUNFengjiao，HEYu，CHENLanming (LaboratoryofQualityandSafeytRiskAssessmentforAquaticProductsonStoragenadPreservation(Shnaghai)，Ministryof Agriculture，CollegeofF0odScienceandTechnology，ShnaghaiOcena University，Shanghai 201306，China) Abstract：Inthisstudy，weestablishedahighlyeffectivemethod toscreenmultiple—drugresistant(MDR)bacteriacarrying theintegrativenadconjugativeelements(ICEs)．FiveProteusvulgarisstrainsharboringSXTR／391familyofICEs，isolated from aquaticproductsinShanghai，China，wereobtainedusinghtenewmehtod．Antimicrobialactiviyt nadheavymetal susceptibilityofthe vulgariss~ainswereexaminedusingstandradKirby-Bauerdiskdiffusionmehtodanddilution susceptibilitytestsaccordingtohteClinicalandLaboratoryStnadardsInstitute(CLSI，USA，2012Edition)，allshowing distinctresistancetotenna timicrobialagentsbelongingtosixdrugclassestested．Inaddition，awideheavymetalresistance profileWasalsodetceted，displayingstrongresistancetoCd，Cu，ZnnadHg．Theconjugationexperimentsdemonstratedhte c