动物细胞融合与单克隆抗体课件人教版选修.pptVIP

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动物细胞融合与单克隆抗体课件人教版选修.ppt

* 了解 动物细胞融合和单克隆抗体技术的应用 理解 1.动物细胞融合和单克隆抗体制备的过程 2.动物细胞融合与植物体细胞杂交的异同 动物细胞融合和单克隆抗体制备的原理与过程 一、动物细胞融合 1 概念: 动物细胞结合形成一个细胞的过程,也称 。 2 原理:与植物原生质体融合的原理相似,即膜的 。 3 结果:形成 ,具有原来两个或多个细胞的遗传信息。 4 诱导方法:聚乙二醇、 、电激等。 细胞杂交 流动性 两个或多个 单核杂交细胞 灭活的病毒 二、单克隆抗体 1.制备原理 每一个B淋巴细胞只分泌 特异性抗体。可通过动物细胞融合技术产生杂交细胞,再由杂交细胞群产生大量的化学性质单一、特异性强的抗体。 杂交瘤 一种 脾脏 抗原蛋白 骨髓瘤细胞 B淋巴细胞 体外 腹腔 杂交瘤细胞 迅速大量繁殖 专一的抗体 3.单克隆抗体的应用 1 优点: 、 、产量大。 2 应用: ①作为 ,具有准确、高效、简易、快速的优点。 ②用于 和 。 特异性强 诊断试剂 治疗疾病 灵敏度高 运载药物 1.阅读教材P52,仔细观察图2-23,探讨下列问题: 1 填写下表比较动物细胞融合与植物体细胞杂交的区别。 2 诱导动物细胞融合特有的诱导手段是什么? 提示:灭活病毒。 2.仔细观察教材P53图2-24,探讨下列问题: 1 制备单克隆抗体过程中的几种细胞有何特点。 提示:①B淋巴细胞:能产生单一抗体,但不能无限增殖。 ②骨髓瘤细胞:能无限增殖,不能产生抗体。 ③杂交瘤细胞:既能产生特殊的抗体,又能在组织培养条件下进行无限增殖。 2 单克隆抗体制备过程中有两次筛选,其目的分别是什么? 提示:①第一次筛选是在B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合之后,筛选出只有B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合的杂种细胞。②第二次筛选需先在多孔培养皿上培养,在每个孔只有一个杂交瘤细胞的情况下开始培养,然后再筛选出能产生特异性抗体的细胞群。 与植物体细胞杂交相比,动物细胞融合的原理及其特有的诱导因子分别是 A.细胞膜的流动性、离心 B.细胞膜的流动性、灭活的病毒 C.细胞的全能性、电刺激 D.细胞的全能性、灭活的病毒 [解析] 植物体细胞杂交的原理是细胞膜的流动性、细胞的全能性,动物细胞融合的原理是细胞膜的流动性;动物细胞融合的常用诱导因素有聚乙二醇、灭活的病毒、电激等,其中灭活的病毒是其特有的诱导因子,而聚乙二醇、电激均可用于诱导植物体细胞杂交。 [答案] B 动物细胞融合中的诱导剂 1 常用的病毒诱导剂有仙台病毒、新城鸡瘟病毒、疱疹病毒等,其中仙台病毒最常用。 2 用做诱导剂的病毒必须事先灭活,使病毒的感染活性、增殖能力丧失但不破坏病毒的抗原结构。 下图是制备分 泌抗X H1N1流感病毒 抗 体的过程,根据图解回答 问题: 1 给小鼠注射抗原的目的是___________________。 2 在单克隆抗体制备过程中之所以选用B淋巴细胞和骨髓瘤细胞,是因为它们融合后的杂交瘤细胞具有___的特性。 3 由图中可看出,单克隆抗体制备过程运用了_______和____________________的动物细胞工程技术手段。 4 动物细胞培养液的配方通常含有葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素等,与植物细胞培养基有所不同的是还含有________。 5 在动物细胞融合过程中,需要将所选取的组织细胞分散开,以利于细胞融合,可用________处理离体组织细胞使之分散。 6 图中有两次筛选过程,其中步骤④的目的是筛选出________________,步骤⑤⑥的目的是筛选出__________。 7 请根据以下信息,设计一方法 不考虑机械方法 ,从培养液中筛选出杂交瘤细胞。已知细胞合成DNA有D和S两条途径,其中D途径能被氨基嘌呤阻断。人淋巴细胞中有这两种DNA的合成途径,但一般不分裂增殖。鼠骨髓瘤细胞中尽管只有D途径,但能不断分裂增殖, 将这两种细胞在试管中混合,加入聚乙二醇促融,获得杂种细胞。 方法:_______________________________________。 原理:_______________________________________。 [解析]  1 根据抗原抗体特异性结合的原理,为获得特定抗体,用特定抗原刺激,小鼠体内便可产生能产生特定抗体的浆细胞,即可获得相应的B淋巴细胞。 2 杂交瘤细胞具有两种细胞的遗传物质,既能产生特定的抗体,又能无限增殖。 3 从图中看出,单克隆抗体技术实际是应用了动物细胞融合和动物细胞培养技术。 4 动物细胞培养液与植物组织培养基相比,除物理状态不同外,成分也不相同,动物细胞培养液中含动物血清。 5 细胞融合时是单个细胞和单个细胞的融合,为将细胞从动物组织中离散,可用胰蛋白酶处理。 6 在单克隆抗体制备过程中,由于从小鼠体内提取的B

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