内皮细胞白细胞附分子-1（ELAM-1）对猪眼小梁细胞表达MMP-3及TIMP-1的影响.pdfVIP

英文缩写 base 碱基对 bp pair cDNAcoⅡlplementa巧DNA互补DNA DAB di锄inobenzidine 3，3’．四盐酸二氨基联苯胺 DEPCdietllylpyrocarbonate 焦炭酸二乙酯 DMEMDulbecco’smodified Eagle。s改良极限必须细胞培养 mediulIl 基 DMSO sulfo】【ide dimemyl 二甲基亚砜 dNllP deox舛bonucleoside三磷酸脱氧核糖核酸 triphoSphate Drr D{tllio妇eitol 二硫苏糖醇 EB ethidiumbromide 溴化乙啶 ECM ex仃acellularmatrix 细胞外基质 EDTAetllylenedi甜ninete仃acetate乙二胺四乙酸 ELAM一1endotllelia leukocyteadllesion内皮细胞白细胞黏附分 molecule．1 子．1 ERK ex仃acellular kinase FBS fetalboVinesemm 胎牛血清 FN Fibronectin 纤维黏连蛋白 HE hematoXylin-eosin苏木素．伊红 脏PES N-2．羟乙基哌嗪N。．2．乙 N-2一hydroxyethyl-piperazine—Nt-2 结果：以上三种方法显示对照组Mh口．3及TIMP。1表达均为阴 未破坏。 结论：本实验结果表明，氧化应激可以诱导小梁细胞表达Mh伊．3 及TIMP—l，并不破坏Mm-3／TIMP．1平衡关系。 二、 EL』～M．1对小梁细胞表达MM咿．3及1rIMP—l的影响 目的：通过研究ELAM．1与抗体结合后对小梁细胞表达M^佃．3 及TIMP．1的影响，进一步了解ELJ～M．1在青光眼发病机制中的作用。 方法：将原代培养的猪小梁细胞血清饥饿培养16小时，分为六 组：I)对照组，不加入任何药物；II)IL一10【组，加入IL．1d刺激； III)EL√～M．1Ab组，用IL．10【刺激后，再加入ELAM．1Ab；Iv) 用IL一1 用条件下作用后，分别用免疫组化法、ELISA法和RT-PCR法检测小 梁细胞MM巴一3及11MP．1的表达，同时用免疫组化法检测EL』心“l 的表达。 结果：在原代培养的猪小梁细胞中，免疫组化和ELISA法显示 显示以上六组1rIMP．1表达均为阳性。免疫组化法显示II、III、v组 的MM咿．3表达为阳性，而RT_PCR显示只有§l零谜狲l翌。i斟戥剖 阳性，其余几组^n佃．3表达均为阴性。另外，免疫组化法显示II组 的ELAM．1表达为阳性，其余几组EL—～M．1表达均为阴性。 结论：外源性IL—ld能刺激猪小梁细胞表达EL-心私l、脚一3 M^仰．3的表达，但不影响耵MP．1的表达，使得M^口仍MP平衡被 破坏。 基于以上两部分实验结果，我们推测ELAM．1与抗体结合后破 坏M^伸仇MP平衡可能在青光眼的发病机制中具有重要作用。 【关键词】青光眼，小梁细胞，内皮细胞白细胞黏附分子，基质金属 蛋白酶，基质金属蛋白酶组织抑制剂。 总前言 青光眼是以眼内液体动力学异常导致眼压升高，超过生理耐受能 力，产生血流动力学异常而引起视神经损害和视野缺损为临床特点的 一组疾病。青光眼是全球主要的致盲眼病。目前全球青光眼患者7000 万，700万患者因青光眼而失