芍药苷对6-ODA诱导的帕金森模型保护作用及其机制的研究.pdfVIP

万方数据 万方数据 芍药苷对6-OHDA 诱导的帕金森模型保护作用及其机制的研究 中文摘要 中文摘要 第一部分：芍药苷对6-OHDA 诱导的大鼠黒质多巴胺能神经 元损伤的保护作用 目的：建立6-OHDA诱导的PD大鼠模型，研究芍药苷（paeoniflorin ，PF ）和酸 通道阻滞剂能否对黑质多巴胺神经元损伤起保护作用。 方法：选取雄性SD大鼠，立体定位仪下右侧纹状体予以注射10ug的6-OHDA （2ug/ul ）制备PD模型。四周后观察阿朴吗啡（Apomorphine ，APO ）诱导的大鼠 对侧旋转行为。模型成功的PD大鼠分6组，分别给予生理盐水、PF （15mg/kg）、PF （30mg/kg ）、PF （60mg/kg ）、阿米洛利（Amiloride ，Ami ，10mg/kg）和狼蛛毒 素（psalmotoxin-1 ，PCTX1 ，0.7ug/kg ）连续治疗21天，每周监测APO诱导的大鼠 对侧旋转行为；给药结束后，处死动物，分离相应的脑组织，免疫组化法尼氏染 色观察阳性神经元数，TH染色观察黑质多巴胺神经元数量；采用高效液相色谱法 （HPLC ）检测损毁侧大鼠纹状体DA及代谢产物DOPAC 、HVA ，5-HT及其代谢产 物5-HIAA 的含量；聚合酶链式反应法 （PCR ）检测损毁侧D1R 、D2R 以及DAT 的 受体mRNA 的表达。 结果：(1)各浓度的PF、特异性酸通道抑制剂PcTx1 、非特异性酸通道抑制剂 Ami均能改善6-OHDA诱导的PD大鼠对侧旋转行为。(2)PD大鼠的未损毁侧黒质尼 氏染色阳性神经元与假手术组无差异。生理盐水组损毁侧黒质尼氏染色阳性神经 元与假手术组相比，下降42.9% （**p 0.01）。与生理盐水组比较，各实验药物治 疗组损毁侧黒质尼氏染色阳性神经元有显著增多（##P0.01 ）。(3)PD大鼠的未损毁 侧黒质TH阳性神经元与假手术组无差异。生理盐水组损毁侧黒质TH阳性神经元与 假手术组相比，下降56.3% （**p 0.01）。与生理盐水组比较，各实验药物治疗组 损毁侧黒质TH 阳性神经元有显著增多 （##P0.01 ）。(4)PD大鼠的未损毁侧纹状体 DA及代谢产物DOPAC 、HVA及DA代谢产物与DA之比与假手术组无差异。与假手 术组相比，生理盐水组损毁侧纹状体DA下降72.1%，DOPAC下降50.3.% ，HVA下 降52.2%，DA代谢产物与DA之比上升46.8% （**p0.01）。与生理盐水组比较，各实 I 万方数据 芍药苷对6-OHDA 诱导的帕金森模型保护作用及其机制的研究 中文摘要 验药物治疗组损毁侧纹状体DA及代谢产物DOPAC 、HVA含量显著升高，DA代谢 产物与DA之比显著下降（##p0.01 ）。生理盐水组损毁侧纹状体5-HT及其代谢产物 5-HIAA 的含量与假手术组相比无明显差异，各实验药物治疗组与生理盐水组相比 亦无明显差异。(5)PD大鼠的未损毁侧纹状体D1R 、D2R 以及DAT 的受体mRNA 的 表达水平与假手术组无差异。生理盐水组损毁侧纹状体D 1R、D2R 以及DAT 的受体 mRNA 的表达水平与假手术组相比下降明显（**p 0.01）。与生理盐水组比较，各 实验药物治疗组损毁侧纹状体D1R 、D2R 以及DAT 的受体mRNA 的表达水平明显升 高（#p 0.05 ，##p 0.01 ）。 结论：通过脑立体定位注射6-OHDA可成功建立PD模型，PF和酸通道阻滞剂 对黑质多巴胺神经元损伤有明显保护作用，对纹状体多巴胺受体有一定调节作用。