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正交法整体优化差异显示反应体系.pdf
遗 传 ! !# $ 研究报告
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正交法整体优化差异显示反应体系
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柳淑芳 !杜立新 !朱 靖 !王爱华 !李宏滨
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! 山东农业大学动物科技学院$泰安 ) 国家水产品质量监督检验中心$青岛 )
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中国农业科学院畜牧研究所$北京
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摘 要! 差异显示 ! $ 是分离差异表达基因的有效方法$但该方
CF5G H=F CF5G271 96 H=F JJF@AH=F
! - 4
法的准确性极易受到外部因素和内部因素的影响(采用正交法优化 JJF@AH=F反应条件$充分考虑到模板浓度*
锚定引物浓度*随机引物浓度* 浓度*镁离子浓度以及 酶用量等因素在差异显示反应过程中的交互作
25@HI /
0
用$一次 反应即可确定最佳反应组合(将筛选出的条件用于 $得到差显结果假阳性率低$重复性和
H=F JJF@AH=F
稳定性好$而且简化了反应条件的优选程序$这表明正交法是优化差异显示反应条件的理想方法(为了进一步简
化整个差异显示反应系统的操作程序$降低假阳性率$研究采用了非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳!.96:/96C721 19
- 4 4 K
$ 和银染显示差异带的方法$并用反向 法来验证回收条带$从而更加优化了差异显示
191:0/. ./1I7IHGLB 5./01/8
-
反应体系(
关键词! )正交优化)非变性 )银染)反向
JJF@AH=F HGLB 5./01/8
中图分类号! 文献标识码! 文章编号! !
M)# G !($N*))! !% N#$N(
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