大纲版2012走向高考一轮生物复习同步课件：4-第五讲 基因工程简介.pptVIP

1．列举基因工程的工具及其作用。 2．区分工具与工具酶。 3．概述作为运载体应具备的条件。 4．概述获取目的基因的途径。 5．描述基因操作的基本步骤。 6．描述基因工程在医药卫生、农牧业、食品工业和环境保护中的作用。 一、基因工程的基本内容 二、基因工程的成果与发展前景 1.基因工程 (1)概念：按照人们的意愿，把一种生物的个别基因复制出来，加以修饰改造，然后放到另一种生物的细胞里，定向地改造生物的遗传性状；又叫基因拼接技术或DNA重组技术。 (2)原理：基因重组。 (3)优点：①克服了远源杂交的不亲和性；②周期短；③目的性强。 (4)不同生物DNA得以重新拼接的基础： ①DNA的基本组成单位都是四种脱氧核苷酸； ②双链DNA分子的空间结构都是规则的双螺旋结构； ③所有生物DNA碱基对均遵循严格的“碱基互补配对”原则，即A总与T配对，G总与C配对——如此，方可使具相同末端(黏性末端或平末端)的不同DNA分子得以连接在一起。 (5)外源基因在受体内表达的理论基础 ①基因是控制生物性状的遗传物质的结构和功能单位，具相对独立性； ②遗传信息的传递都遵循中心法则所阐述的信息流动方向； ③生物界共用一套遗传密码。 归纳总结 四大工程的区别与联系 2.基因操作的“工具” 3.“工具酶” (1)限制性内切酶：能识别特定核苷酸序列，并在特定位点上切割DNA分子。 (2)DNA连接酶：用于将运载体与目的基因进行“缝合”，即连接二者的黏性末端。 4．运载体与质粒 (1)运载体的作用 一是作为运输工具，将目的基因转移到宿主细胞中；二是利用它在宿主细胞内对目的基因进行大量的复制。 (2)作为运载体必须具备三个条件 ①能在宿主细胞中稳定保存下来并大量复制； ②有多个限制酶切点，以便切出的黏性末端与外源基因连接，而且每种酶的切点最好只有一个，如大肠杆菌pBR332质粒就有多种限制酶的单一识别位点，适于多种限制酶切割的DNA插入； ③有一定的标记基因，便于进行筛选。如大肠杆菌pBR332质粒携带氨苄青霉素抗性基因和四环素抗性基因，就可以作为筛选的标记基因。 (3)基因工程的常用运载体举例 质粒是目前最常用的运载体，质粒是存在于细菌或酵母菌中染色体DNA以外的一种小型环状DNA分子，而运载体除这种小型环状DNA分子外，还可有噬菌体(细菌病毒)及动植物病毒等。另外，许多运载体是经人工改造的大肠杆菌质粒。 特别提示 (1)明确“运载体”与“质粒”的关系 凡符合作为运载体三个条件的均可被用作基因工程的运载体，如质粒、噬菌体及动植物病毒等。 质粒与运载体的关系如下： 一方面，质粒是基因工程最常用的运载体，但运载体并非都是质粒。另一方面，并非所有质粒均适合作为运载体，有许多质粒未必完全符合作为运载体的三个条件(如未必有合适的标记基因等)。 (2)一般来说，天然运载体往往不能满足上述要求，因此需要根据不同的目的和需要，对天然运载体进行人工改造。现在所使用的质粒载体几乎都是经过改造的。 特别提醒 1．限制性内切酶和DNA连接酶的作用部位都是脱氧核苷酸之间形成的磷酸二酯键(不是氢键)，只是一个切开，一个连接。 2．质粒是最常用的运载体，不要把质粒同运载体等同，除此之外，噬菌体和动植物病毒也可作为运载体。运载体的化学本质是DNA，其基本单位为脱氧核苷酸。 3．要想从DNA上切下某个基因，应切2个切口，产生4个黏性末端。 4．基因工程中工具酶有两种——限制性内切酶和DNA连接酶；工具有三种，除上述两种工具酶外还包括运载体。 5．DNA酶即DNA水解酶，是将DNA水解的酶；DNA聚合酶是在DNA复制过程中，催化形成新DNA分子的酶，是将单个游离的脱氧核苷酸加到DNA片段上，需要模板；但DNA连接酶是将两个DNA片段的两个缺口同时连接，不需要模板，两者作用的化学键相同，都是磷酸二酯键。 【例1】　(2010·太原模拟)现有一长度为1000个碱基对(bp)的DNA分子，用限制性内切酶(EcoRⅠ)酶切后得到的DNA分子仍是1000 bp，用KpnⅠ单独酶切得到400 bp和600 bp两种长度的DNA分子，用EcoRⅠ、KpnⅠ同时酶切后得到的200 bp和600 bp两种长度的DNA分子。该DNA分子的酶切图谱正确的是(　　) 解析：本题具有创新性和推理性，解答时应综合考虑，特别是EcoRⅠ酶切后碱基对数量不变，长度不变，说明切割后仍是一条DNA分子，应考虑到最初DNA分子呈环状。 答案：D (2010·哈尔滨质检)质粒是基因工程中最常用的运载体，它存在于许多细菌体内。质粒上的标记基因如图所示，通过标记基因可以推知外源基因(目的基因)是否转移成功。外源基因插入的位置不同，细菌在培养基上的生长情况也不同，下表是外源基因的插入位置(插入点有a、b