第十六章细胞死亡与衰老精要.pptVIP

酵母程序性死亡的意义： 促进酵母的接合繁殖（未接合者死），形成更优势的“杂合体”； 使有限的营养供给具有最佳适应性的个体（“衰老”者死）； 不同种酵母展开营养源“争夺战”时释放毒素，导致其它种属的酵母发生程序性死亡。 第二节 细胞衰老 一、细胞衰老的概念与特征 二、细胞衰老的分子机制 三、细胞衰老与个体衰老的关系 * 第十六章 细胞死亡与细胞衰老 第一节 细胞死亡 第二节 细胞衰老 对于多细胞生物，细胞的死亡是维持整个生物体的正常生长发育及生命活动的必要条件，其重要性不亚于细胞的增殖。 细胞死亡的方式多种多样，包括细胞凋亡（apoptosis）、细胞坏死（necrosis）和自噬性细胞死亡（autophagic cell death）。 细胞衰老（cell ageing，cell senescence）主要指复制衰老，是体外培养的正常细胞经过有限次数的分裂后，停止生长，细胞形态和生理代谢活动发生显著改变的现象。 第一节 细胞死亡 程序性细胞死亡（programmed cell death，PCD）：是指受到严格的基因调控的程序性的细胞死亡形式。细胞死亡往往受到细胞内某种由遗传机制决定的“死亡程序”控制，所以被称为细胞程序性死亡。 动物细胞典型的程序性死亡方式包括凋亡、坏死和自噬性细胞死亡。 一、细胞凋亡 二、细胞坏死 三、自噬性细胞死亡 四、植物细胞与酵母细胞的程序性死亡 一、细胞凋亡 细胞凋亡（apoptosis）： 是借用古希腊语，意指树叶或花瓣的凋零脱落; 细胞凋亡是一个由基因决定的主动的生理性自杀行为，即细胞接受某些特定信号刺激后进行的正常生理应答反应; 细胞凋亡具有典型的形态学和生化特征，凋亡细胞最后以凋亡小体被吞噬消化。 （一）细胞凋亡的特征 动物细胞凋亡的过程在形态学上可分为3个阶段： ① 凋亡的起始： 细胞表面的特化结构如微绒毛消失，细胞间接触的消失，但细胞膜依然完整；线粒体大体完整；核糖体逐渐从内质网上脱离，内质网囊腔膨胀，并逐渐与质膜融合；染色质固缩，形成新月形帽状结构等形态，沿着核膜分布。 ② 凋亡小体的形成： 凋亡小体（apoptotic body）是细胞凋亡过程中断裂的大小不等的DNA或染色质片段与细胞其它内含物一起被反折的细胞质膜包裹，在细胞表面产生许多泡状或芽状突起，然后逐渐分离，形成的单个圆形小体。 ③ 凋亡小体的被吞噬： 凋亡小体逐渐被邻近的细胞识别并吞噬消化。 细胞凋亡的特征： 最重要的特征是凋亡过程中细胞膜保持完整，细胞内含物没有泄漏到细胞外，不引发机体的炎症反应(这也是细胞凋亡与坏死的主要区别)。 另一个重要特征是染色质DNA在核小体间发生断裂，形成长度为200 bp倍数的大小不等DNA片段。 此外，凋亡通常是生理性变化，而细胞坏死是病理性变化。 细胞凋亡的过程及特征 细胞皱缩 凋亡小体 吞噬 正常胸腺细胞（左）与凋亡胸腺细胞（右）比较（注意凋亡小体） （二）细胞凋亡的检测方法 形态学观察： DNA电泳： DNA断裂的原位末端标记法（TUNEL法）： 彗星电泳法（comet assay）：彗星电泳法的原理是将单个细胞悬浮于琼脂糖凝胶中，经裂解处理后，再进行短时间的电泳，并用荧光染料染色。凋亡细胞中的DNA降解片段在电泳时迁移较快，使细胞核呈现出一种彗星式图案，而正常细胞核则保持圆球形。 流式细胞分析：用流式细胞仪检出凋亡的亚二倍体细胞。 检测膜成分变化： 凋亡细胞的染色质凝集 B：凋亡细胞核 1、形态学观察：染色法、透射和扫描电镜观察。 A：正常细胞核 2、DNA电泳：DNA片段就呈现出梯状条带（DNA ladder），即凋亡细胞的DNA由于在核小体间发生断裂，产生200 bp及其整倍数的片段，经琼脂糖凝胶电泳呈现出的梯状条带。 左：正常16体节期的斑马鱼胚胎在发育过程中有少量细胞发生凋亡； 右：突变体的中枢神经细胞发生大量凋亡。 3、DNA断裂的原位末端标记法（TUNEL法）：即末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP 缺口末端标记测定法，能对DNA分子中断裂缺口中的3’-OH进行原位标记。 （三）细胞凋亡的生物学及医学意义 细胞凋亡的意义：细胞凋亡对生物体的正常发育、自稳态平衡、免疫耐受的形成、肿瘤监控以及抵御内外各种因素的干扰方面都起着非常关键的作用：如脊椎动物的神经系统的发育，发育过程中手和足的成形过程，蝌蚪尾的消失，骨髓和肠的细胞凋亡。 细胞凋亡的失调，包括不恰当的凋亡的激活或抑制以及过度凋亡等，都会引发多种疾病。 如：对凋亡诱导因子敏感性的降低是多种肿瘤细胞的基本特征。 神经元细胞凋