动物细胞培养和核移植资料.pptVIP

1、细胞全能性的定义？原因？ 2、植物组织培养的原理？基本流程？条件？培养基成分？ 3、脱分化、再分化的实质？俞伤组织的特点？ 4、植物体细胞杂交技术的原理？去壁的方法？诱导原生质体融合的方法？原生质体融合的实质？原生质体融合完成的标志？植物体细胞杂交技术完成的标志？优势？ 5、植物繁殖的新途径有？列举微型繁殖、人工种子的优点？如何使作物脱毒？ 6、作物新品种的培育包括？单倍体育种的流程？优点？ 7、怎样培育突变体？ 8、怎样进行细胞产物的工厂化生产？ 动物细胞培养 动物细胞融合 生产单克隆抗体 动物细胞核移植 动物细胞工程常用技术 　　其中动物细胞培养技术是其他动物细胞工程技术的基础 1.动物细胞培养概念： 从动物机体中取出相关的组织,将它分散成单个细胞,然后,放在适宜的培养基中,让这些细胞生长和增殖。 2、原理： 细胞增殖 动物组织块 制成细胞悬液 传代培养 胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞 幼龄动物的器官组织或胚胎 用胰蛋白酶等处理贴壁细胞 适宜条件，原代培养 3、动物细胞培养的过程 细胞增殖能力强，分裂旺盛，容易培养 使细胞与培养液充分接触，利于吸收营养，排出代谢废物 加入培养液 细胞间的物质主要是蛋白质 细胞生长特点：细胞贴壁、接触抑制 强调：动物细胞生长特性（一）： 细胞贴壁：在悬液中分散的细胞贴附在瓶壁上，称为细胞贴壁。 培养瓶或培养皿壁要求：表面光滑、无毒、易于贴附。 接触抑制：贴壁生长的细胞生长到表面相互接触后，细胞停止分裂增殖（形成一个单层）。 接触抑制 强调：动物细胞生长特性（二）： 原代培养：动物组织消化后的初次培养称为原代培养。 传代培养：贴满瓶壁的细胞，需要重新用胰蛋白酶等处理，然后分瓶继续培养，让细胞继续增殖。 10-50代，增值缓慢，以至停止，部分细胞的细胞核型可能发生变化； 50代以后，少部分细胞克服细胞寿命的自然极限，获得不死性，即变为癌细胞。 强调：原代培养与传代培养 总结：动物细胞培养过程 胚胎或幼龄动物的组织、器官 制成细胞悬液 剪碎，用胰蛋白酶处理 10代细胞 转入培养瓶 50代细胞 传代培养 无限传代 单个细胞 加培养液稀释 传代10代以内，遗传物质不改变，保持正常二倍体核型。 传代10-50代左右，增长缓慢以至于完全停止，部分细胞核型可能发生变化 分瓶传代培养 培养细胞特点：细胞贴壁、接触抑制 50代后，少部分细胞获得不死性，遗传物质已经改变，等同于癌细胞。 原代培养 4、动物细胞培养的条件: 1）无菌无毒 的环境： 适宜的温度：36.5±0.5℃ 适宜的酸碱度：PH：7.2-7.4 液体合成培养基：葡萄糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等；通常还需加入血浆、血清等天然成分。 4）气体环境： 2）营养： 3）温度和pH： “95％空气+5％CO2”的混合气体培养箱。氧气是细胞代谢必须的； CO2维持培养液的PH 首先对培养液和所有培养用具无菌处理；通常培养液中添加抗生素防止培养过程中污染；此外定期更换培养液以清除代谢产物，防止对培养细胞造成危害。 5、动物细胞培养技术的应用（阅读课本46-47页）: 1）生物制品的生产 如病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体 2）基因工程技术中常用的受体细胞 3）检测有毒物质，判断某种物质的毒性 4）细胞的生理、药理、病理研究 如用于筛选抗癌药物 比较项目 植物组织培养 动物细胞培养 原理 培养基性质 培养基特有成分 培养结果 细胞的全能性 细胞增殖 植物组织培养和动物细胞培养的比较 固体培养基 液体培养基 蔗糖 植物激素 葡萄糖 动物血清 大量产生细胞或细胞产物 获得新个体或细胞产品 1、动物细胞培养能否像植物组织培养那样最终培养成新个体？ 不能，动物细胞培养只能使细胞数目增多，不能发育成新的动物个体 2、怎样利用动物的细胞获得完整的动物个体？ 动物细胞核移植 二、动物体细胞核移植技术 和克隆动物 将动物的一个细胞的细胞核，移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中。使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育为动物个体。 用核移植的方法得到的动物称为克隆动物。 1、动物核移植： 克隆：指从一个共同的祖先，通过无性繁殖的方式产生出来的一群遗传特性相同的DNA分子，细胞或个体。 克隆包括三个层次 分子水平：如PCR扩增DNA 细胞水平：如动物细胞培养 个体水平：如克隆动物 1、动物细胞工程常用的技术手段有哪些？其 中哪项技术是其他技术的基础？ 2、动物细胞培养的原理、过程？其中制成细胞悬液的目的？ 3、动物细胞生长的特性？ 4、原代培养和传代培养有什么区别？ 5、动物细胞培养的条件