毛细管区带电泳分析梅洁.pptVIP

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毛细管区带电泳分析梅洁.ppt

胶体粒子的电学性质 胶体粒子表面带有电荷 电 泳 Gouy-Chapman-Stern 模型 Smoluchowski 认为在电场中粒 子的运动是带电粒子表面的静电力F1 及阻力F2的综合结果。 在一定条件下,即F1+F2=0和 当κα1时粒子表面可作为平面处理, u= 当κα1时 u= Henry等的研究证明,对电泳速度 有影响的作用力除了Smoluchowski提出 静电力F1及阻力F2外,还有电泳滞后效 应(retardation effect)和电泳弛豫效应 (relaxation effect)的贡献。 电泳滞后效应 在外加电场的作用下,中心离子同 其溶剂化分子一起向某一方向移动,而带 有相反电荷的离子氛则同溶剂化分子一起 向相反方向移动,从而增加了粘滞力,阻 滞了离子在溶液中的运动,这种影响称为 电泳滞后效应 Henry公式中假设粒子使一种规则的 球形,忽略了对粒子的真实形状的考虑。 实际上,当粒子表面不规则尺寸远小于粒 子粒径时,Stock力是主要阻力。而粒子很 不规则时(不规则尺寸大于或等于双电层厚度),粒子的电泳滞后效应变得显著 了。 聚苯乙烯胶乳微球 无机胶粒和有机胶粒 脂蛋白颗粒 病毒 脂质体和膜微囊 生物细胞 聚苯乙烯胶乳微球( PSL ) PSL微球的大小和几何形状能被很好的确定,所以它已广泛地作为模型来研究胶体。 表面电学性质:在PSL微球的制备过程中,由于乳化剂的存在,使得聚合物乳液的乳胶粒表面吸附一层乳化剂分子,从而使胶乳微球表面带有某种电荷。 CZE在PSL微球中的应用 CZE分离不同组成成分的PSL微球混合物 CZE测定PSL微球的电泳淌度 CZE用于研究两种不同组成成分的胶乳粒子之间的相互作用。 微球的表观电泳淌度与 粒子的表面电荷(或荷质 比)之间无线性关系。 VanOman提出PSL微球的分离是因为 各粒子与毛细管内壁相互作用造成不同程 度的粒子滞后而产生的 Ballou认为PSL微球的分离与粒子自身 的性质有关 检测器——UV Vanifatova等发现粒径在50nm~ 200nm内,UV的最大吸收波长在短波长 范围内,粒径在400nm~600nm内,UV 的最大吸收波长在长波长范围内。 脂质体的应用 由于它的磷脂双分子膜与细胞膜结构类似,可作为细胞模型 可作为靶向药物的载体 脂质体毛细管电泳 自由脂质体毛细管电泳 脂质体修饰的毛细管电泳 在脂质体电动色谱中,其迁移指征(migration index)能够很好的与药物的logp相关,并且各指征有很好的重现性。其数据可应用于定量构效关系(QSAR),定量保留-效应关系(QRAR),吉布斯自由能,溶剂化能力的线形关系模型(LSER)等数学模型的研究。 脂质体有包封脂溶性药物或水溶性药物的特性,药物被脂质体包封后有主要特点: 靶向性和淋巴定向性 缓释性 细胞亲和性与组织相容性 降低药物毒性 保护药物提高稳定性 脂质体的评价指标 脂质体的形态、粒径及其分布 包封率的测定 渗透率的测定 药物体内分布的测定 CZE在脂质体中的应用 CZE测定粒径分布均匀程度 CZE可用于分离了不均一组成成分的脂质体 CZE可作为一种评价脂质双层刚性程度的分析方法 CZE可测定单个脂质体的电泳淌度 Tsukagoshi和Roberts首次报道了 利用CZE分析脂质体 实验表明,SUV的电泳峰较窄,MLV 的电泳峰却相对较宽。且MLV的绝对电泳 淌度平均值明显高于SUV的平均值。造成 这种现象的原因可能是因为粒子的迁移依 赖其粒子自身的大小。 同时脂质体与毛细管内壁相互作用 并不强 Roberts等提出相反观点—认为 脂质体与毛细管内壁之间有很强 的作用 当电泳温度达到脂质体组成成分的相变温度(凝胶态转变为溶胶态或刚性转变为柔性)时,脂质体的电泳淌度会发生“跃迁” 在“柔性”脂质体中渗入CH或带有丙烯酰基链的物质,脂质体的电泳淌度也会增加 毛细管ID 50μm,电泳缓冲液10mM HEPES

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