小鼠肠道菌群失模型的建立及菌群失衡对肠道机械屏障的影响.pdfVIP

小鼠肠道菌群失衡模型的建立 及菌群失衡对肠道机械屏障的影响 硕士研究生： 李晓芳 指导教师： 唐立教授 指导小组： 文姝副教授 专业名称： 病原生物学 摘 要 目的： 1．以肠道十四种优势菌群变化情况为依据，建立轻度菌群失衡和重 度菌群失衡小鼠模型。 2．研究肠道菌群失衡对小鼠肠粘膜机械屏障的影响，探讨优势菌群 与肠道粘膜屏障的相互作用机制。 方法： 1．采用抗生素头孢曲松钠灌胃的方式建立小鼠肠道菌群失衡模型。 以头孢曲松钠终浓度59／kg／d的剂量，连续8天，取盲肠内容物进行肠道 菌群分析，建立小鼠轻度菌群失衡模型；以头孢曲松钠终浓度89／kg／d 的剂量，连续8天，分析肠道菌群，建立小鼠重度菌群失衡模型。 2．利用HE染色及电镜技术观察正常组、轻度茵群失衡组、重度茵群 失衡组小鼠肠道粘膜绒毛形态变化，用ELISA法检测肠粘膜分泌性免疫 球蛋白SIgA分泌量变化，RT．PCR技术及免疫组化法检测肠粘膜粘液素 Muein2、Muein3，防御素含量的变化。 结果： 1．头孢曲松钠59／kg／d，连续8天灌胃，肠道优势菌群显著下降，建 立轻度菌群失衡小鼠模型：头孢曲松钠89／kg／d，连续8天灌W，肠道优 势菌群的数量几乎降至零，建立重度菌群失衡小鼠模型。 2．菌群失衡小鼠肠粘膜绒毛出现肿胀、断裂，绒毛顶端肠上皮细胞 坏死、脱落，细胞间间隙增宽，胞浆内出现空泡结构，粘膜及粘膜下层 有淋巴细胞浸润，重度菌群失衡与轻度菌群失衡小鼠相比较绒毛结构受 损加重。 3．菌群失衡小鼠小肠段肠粘膜分泌性免疫球蛋白SIgA分泌水平下 降，重度菌群失衡组与正常组比较下降呈显著变化(P0．05)，与轻度 菌群失衡组相比下降明显。 水平的表达与正常小鼠相比明显增强，在杯状细胞胞浆内Mucin2蛋白阳 性表达增强，且重度菌群失衡组与轻度菌群失衡组小鼠比较，粘液素 Mucin2、Mucin3、防御素增强明显。 结论：抗生素干扰肠道优势菌群，建立肠道菌群失衡模型。菌群失衡可 导致肠道机械屏障粘膜绒毛结构受损，肠粘膜免疫水平下降，SIgA分泌 量随菌群失衡程度呈下降趋势，同时引起粘液层中粘液素和防御素分泌 量增加。 关键词：菌群失衡 绒毛形态 粘液素 防御素 SIgA 2 The of Modeland Establishment Dysbacteria The to IntestinalBarrier Influencethe Physical Master Li degreecandidate：Xiaofang Li Supervisor：ProfessorTang ShuWen Vice—supervisor：Professor Major：PathogenicBiology Abstract Objective： 1．Establishdifferent micemodelbasedonintestinal dysbacteria dominantflora