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- 2016-04-02 发布于安徽
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2.常用的蛋白质分离方法 (1)凝胶色谱法 ①识图 凝胶色谱法分离蛋白质的原理 ②分析比较列表如下: 蛋白质 比较 相对分子质量大 相对分子质量小 凝胶内部 排阻在凝胶颗粒外面,______ 通过 进入凝胶颗粒内部,被_____ 运动方式 垂直向下 _________和_______扩散运动 运动路程 较短 较长 洗脱次序 先流出 后流出 迅速 滞留 垂直向下 无规则 (2)电泳法原理 ①在一定pH下,一些生物大分子(如多肽、核酸等)可解离的基团会带上正电或负电,在电场的作用下,这些带电分子会向着与其所带电荷_____的电极移动。 ②由于分离样品中各种分子带电性质的差异以及分子本身的大小、形状不同,使带电分子产生不同的迁移速率,从而实现样品中各种分子的分离。 相反 3.血红蛋白的提取和分离过程 4.结果分析与评价 (1)血红蛋白的提取和分离时红细胞分层不明显,可能是洗涤次数少、未能除去血浆蛋白的原因。此外,离心速度过高和时间过长,会使白细胞和淋巴细胞一同沉淀,也得不到纯净的红细胞,影响后续血红蛋白的提取纯度。 (2)凝胶的装填标准是紧密、均匀。如果色带均匀、狭窄、平整,说明凝胶色谱柱的性能良好。如果色谱柱出现纹路或是气泡,轻轻敲打柱体以消除气泡,消除不了时要重新装柱。 (3)G-75:“G”代表凝胶的交联程度,膨胀程度及分离范围,
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