2013实验五酵母菌的形态观察、死活细胞的鉴别及显微镜直接计数法重点.pptVIP

酵母菌的形态观察、死活细胞鉴别及显微镜直接计数法 一、实验目的 1、观察酵母菌的形态及出芽生殖方式，学习区分酵母菌死活细胞的实验方法。 2、明确血细胞计数板的原理，掌握使用血细胞计数板进行微生物计数的方法。 二、实验原理 酵母菌是不运动的单细胞真核微生物，其大小通常比常见细菌大几倍甚至十几倍。大多酵母菌以出芽方式进行无性繁殖，有的分裂繁殖，有性繁殖是通过接合产生子囊孢子。本实验是通过美蓝染液水浸片来观察酵母菌的形态和出芽生殖方式。 美蓝是一种无毒性的染料，它的氧化型呈兰色，还原型无色，用美蓝对酵母的活细胞进行染色时，由于细胞的新陈代谢作用，细胞内具有较强的还原能力，能使美蓝由兰色的氧化型变为无色的还原型。因此，具有还原能力的酵母活细胞是无色的，而死细胞或代谢作用微弱的衰老细胞则呈兰色或淡兰色，借此即可对酵母菌的死细胞和活细胞进行鉴别。但美蓝的浓度、作用时间等均有影响，应加注意。 显微镜直接计数法是将小量待测样品的悬浮液置于一种特别的具有特定面积和容积的载玻片上(又称计菌器），于显微镜下直接计数的一种简便、快速、直观的方法。目前国内常用的计菌器有：血细胞计数板、Peteroff-Hauser计菌器以及Hawksley计菌器等，它们都可用于酵母、细菌、霉菌孢子等悬液的计数。 利用血细胞计数板在显微镜下直接计数是一种常用的微