1.基因工程选修3要点.pptVIP

二、基因操作的工具 1、基因的“剪刀” ── 存在 ：主要存在微生物中 作用和特点： 识别的序列的特点： 运载体 种类： ★　本部分知识多以选择题的形式出现，并且与必修内容联系密切，也可在基因工程综合题中作为某一具体问题出现。 1、表达载体的组成 启动子 终止子 目的基因 标记基因 复制原点等 第四步：目的基因的检测与鉴定 1、目的基因导入检测 ①通过质粒上的标记基因，在选择性培养基上，筛选出含有重组DNA的受体细胞 ② DNA分子杂交技术－－（使用DNA探针） * * DNA复制主要在细胞内完成，以DNA的两条链为模板，根据碱基互补配对原则合成两个完全相同的DNA分子的过程。复制的条件是：以DNA双链作模板，以四种脱氧核苷酸为原料，需要线粒体供应，还需要多种酶，如解旋酶、DNA聚合酶等。 PCR技术是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术。它遵循的原理与DNA复制原理相同，条件是有一段已知目的基因的核苷酸序列和根据核苷酸序列合成的引物；原料是四种脱氧核苷酸，也需要多种酶，如DNA聚合酶。在PCR扩增仪上自动复制。 RNA聚合酶识别和结合的一段特殊结构的DNA片段，位于基因的首端，RNA聚合酶与之结合才能驱动基因转录出mRNA，进而获得需要的蛋白质。 终止子 一段特殊结构的DNA片段，位于基因的尾端，作用是使转录在所需要的地方停止。 抗性基因鉴别受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来。 专题一 基因工程 小猪被转入了能合成绿色荧光蛋白质的水母基因 提取 普通猪 (不能分泌绿色荧光蛋白) 水母 绿色荧光基因 与运载体DNA拼接 导入 猪受精卵(含荧光基因) 转基因猪 (能分泌绿色荧光蛋白) 1、原理： 2、操作水平： 3、操作环境： 4、结果： 基因重组 DNA分子水平 生物外 定向地改造生物的性状，获得人类所需要的品种。 一、基因工程的概念 （专一性） 限制性核酸内切酶（限制酶） 产生两个带黏性末端或平末端的ＤＮＡ片段 限制酶切开的是什么键： 磷酸二脂键 反向对称重复排列 一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列，并在特定的切割点上将DNA 分子切断。 （无识别序列或已被修饰） 切割结果： 2、要想获得某个特定性状的基因必须要用限制酶切几个切口？切断几个磷酸二酯键？可产生几个黏性末端？ 要切两个切口 , 断四个磷酸二酯键，产生四个黏性末端。 3、不同的DNA用同一种限制酶来切割，会怎样呢？ 会产生相同的黏性末端，然后让两者的黏性末端黏合起来，可以合成重组的DNA分子了。 思考： 1、限制性核酸内切酶与DNA水解酶相比有何不同？ DNA水解酶将DNA分子水解成单个核苷酸，限制性核酸内切酶只能将DNA分子分解成特定的DNA片段。 思考：DNA连接酶与DNA聚合酶的作用有何不同？ DNA聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯键。 DNA连接酶是连接两个DNA片段的末端，形成磷酸二酯键。（不需要模板） ２、基因的针线──DNA连接酶 （1）来 源：微生物 EColi DNA连接酶，只能连接黏性末端。从T4噬菌体中分：T4 DNA连接酶，能连接黏性末端，又能连接平末端 无专一性 （2）种类：从大肠杆菌中分离： 　3、运载体－－能将外源基因送入细胞的工具　 条件： 质粒、噬菌体和动植物病毒。 （2）本质：小型双链环状DNA分子；以独立于染色体（或拟核DNA分子）之外的方式存在。 （1）分布：存在于许多细菌及酵母菌等生物体内 能在受体细胞中复制并稳定保存。 具有一个至多个限制性核酸内切酶切点，供外源DNA片段插入。 常含有标记基因。（如：抗生素抗性基因、抗生素合成基因、固氮基因、色素基因） 注意：天然质粒一般需改造。 例1．下图为DNA分子的某一片段，其中①②③分别表示某种酶的作用部位，则相应的酶依次是(　　) A．DNA连接酶、限制酶、解旋酶 B．限制酶、解旋酶、DNA连接酶 C．解旋酶、限制酶、DNA连接酶 D．限制酶、DNA连接酶、解旋酶 C 高考地位：5年21考 第一步：目的基因的获取 方法 人工合成（反转录法和化学合成法） 目的基因的核苷酸序列是巳知的 PCR扩增技术 目的基因的核苷酸序列是未知的 基因文库，从基因文库中找到目的基因 思考：它的原理，条件及过程如何？ 基因文库：是将含有某种生物不同基因的许多DNA片段，导入受体菌的群体中而储存，各个受体菌分别含有这种生物的不同基因。 模板DNA、引物、耐高温DNA聚合酶、四种脱氧核苷酸、 三、基因工程的基本操作程序 ① 概念：PCR全称为_______________，是一项 在生物__