11脂肪酸氧化.pptVIP

脂肪酸的β-氧化 1.了解脂肪酸的β-氧化作用. 2.通过测定和计算反应液内丁酸氧化生成丙酮的量，掌握测定β-氧化作用的方法及其原理。? 本实验用新鲜肝糜与丁酸保温，生成的丙酮在碱性条件下，与碘生成碘仿。反应式如下： 2NaOH +I2 NaOI +NaI +H2O CH3COCH3 +3NaOI CHI3（碘仿） +CH3COONa +2NaOH 剩余的碘，可以用标准硫代硫酸钠滴定。 NaOI +NaI +2HCl I2 +2NaCl +2H2O I2 +2Na2S2O3 Na2S4O6 +2NaI 根据滴定样品与滴定对照所消耗的硫代硫酸钠溶液体积之差，可以计算由丁酸氧化生成丙酮的量。 1.实验材料： 新鲜猪肝（兔肝） 3.实验试剂： 0.1%淀粉溶液；0.9%氯化钠溶液； 15%三氯乙酸溶液；10%氢氧化钠溶液； 10％盐酸溶液；0.5mol/L丁酸溶液； 0.1mol/L碘溶液；0.01mol/L标准硫代硫 酸钠溶液；1/15mol/L pH7.6磷酸盐缓冲液 (一)肝糜的制备 称取肝组织5g置于研钵中。加少量0.9%氯化钠溶液，研磨成细浆。再加入0.9%氯化钠溶液至总体积为10mL。 （二）β-氧化作用 取2个50mL锥形瓶，各加入3mL 1/15mol/L pH7.6磷酸盐缓冲液。向其中一个锥形瓶中加入2mL正丁酸，另一个锥形瓶作为对照，不加正丁酸。然后各加入2mL肝组织糜。混匀，置于43℃恒温水浴中保温30min 。 (三)沉淀蛋白质 保温30min后，取出锥形瓶，各加入3mL15%三氯乙酸溶液，在对照瓶内追加2mL正丁酸，混匀，静置15min后过滤。将滤液分别收集在两个试管中。 （四）酮体的测定 吸取2种滤液各2mL分别放入另两个锥形瓶中，再各加3mL0.1mol/L碘溶液和3mL10%氢氧化钠溶液。摇匀后，静置10分钟。 加入3mL10%盐酸溶液中和。然后用0.01mol/L标准硫代硫酸钠溶液滴定剩余的碘。滴定至浅黄色时，加入3滴淀粉溶液作为指示剂。摇匀，并继续滴到蓝色消失。记录滴定样品与对照所用的硫代硫酸钠溶液的毫升数，并按下式计算样品中的丙酮含量。 (五)计算 肝脏中的丙酮含量（mmol/g）= （A-B）×C Na2S2O3 ×1/6 式中：A：滴定对照所消耗的0.01mol/L硫代硫酸钠溶液的mL数； B：滴定样品所消耗的0.01mol/L硫代硫酸钠溶液的mL数。 C Na2S2O3：标准硫代硫酸钠溶液的浓度(mol/L)。 1/6：1mol标准硫代硫酸钠相当于丙酮的量 【注意事项及思考题】 注意事项： 肝糜必须新鲜，放置过久则失去氧化脂肪酸的能力。 思考题： 1、什么是酮体？ 2、本实验如何计算样品中的丙酮含量？ 求职应注意的礼仪 求职时最礼貌的修饰是淡妆 面试时最关键的神情是郑重 无论站还是坐，不能摇动和抖动 对话时目光不能游弋不定 要控制小动作 不要为掩饰紧张情绪而散淡 最优雅的礼仪修养是体现自然 以一种修养面对两种结果 必须首先学会面对的一种结果----被拒绝 仍然感谢这次机会，因为被拒绝是面试后的两种结果之一。 被拒绝是招聘单位对我们综合考虑的结果，因为我们最关心的是自己什么地方与用人要求不一致，而不仅仅是面试中的表现。 不要欺骗自己，说“我本来就不想去”等等。 认真考虑是否有必要再做努力。 必须学会欣然面对的一种结果----被接纳 以具体的形式感谢招聘单位的接纳，如邮件、短信 考虑怎样使自己的知识能力更适应工作需要 把走进工作岗位当作职业生涯的重要的第一步，认真思考如何为以后的发展开好头。 Thank you * 【实验目的】 【实验原理】 在肝脏中，脂肪酸经β-氧化作用生成乙酰CoA。2分子乙酰CoA可缩合生成乙酰乙酸。乙酰乙酸可脱羧生成丙酮，也可还原生成β-羟丁酸。乙酰乙酸、β-羟丁酸和丙酮总称为酮体。 【实验材料和主要仪器、试剂】 2.实验仪器： 锥形瓶50mL、移液管、微量滴定管5mL、漏斗、 恒温水浴锅 【操作步骤】 幻灯片放映结束 ！ 请您提出宝贵意见！ O(∩_∩)O谢谢各位！！！