--过氧化物酶体和膜泡运输分析报告.ppt

第六节 内膜系统与小泡运输 （二）COP I衣被小泡 功能：回收、转运内质网逃逸蛋白（escaped proteins）返回内质网；也可介导高尔基体不同区域间的蛋白质运输。 组成：由7种蛋白组成。 回收信号：Lys-Asp-Glu-Leu（KDEL）。 COP I Vesicles Cop I and II Vesicles Cop I and II Vesicles Lys-Asp-Glu-Leu（KDEL） （三）COPⅡ衣被小泡 介导内质网到高尔基体的物质运输。形成于内质网出口位点，该处无核糖体。 主要亚基：Sar1GTP、Sec23/Sec24、Sec13/Sec31。 多数跨膜蛋白直接与COP II结合，少数跨膜蛋白和多数可溶性蛋白通过受体与COP II结合。 分选信号：位于跨膜蛋白胞质面，形式多样，常包含双酸性基序[DE]X[DE] ，如Asp-X-Glu。 COP II Vesicles COPII Coated vesicle 衣被形成 衣被召集GTP酶：为G蛋白，活化状态可引起衣被蛋白聚集，包括ARF和SAR 1。存在于细胞质，激活后转位到膜上。 ARF：参与clathrin和COP I衣被的形成。 SAR 1：参与COP II衣被的形成。 ER上形成COPII小泡时，SAR1交换GDP/GTP而激活。 激活的SAR1暴露出脂肪酸链尾巴，插入ER膜，促进衣被蛋白的核化和组装。 SAR1可激活磷脂酶D，将一些磷脂水解，使衣被蛋白牢固地结合在膜上。 当小泡从膜上释放后，衣被很快就解体。 Coat assembly 四、膜泡运输的定向机制 （一）SNAREs （ (an acronym derived from SNA P (Soluble NSF Attachment Protein) RE ceptor) 功能：介导运输小泡与靶膜的融合。 类型：v-SNAREs和t-SNAREs。 结构：具有一个螺旋结构域，相互缠绕形成跨SNAREs复合体，将小泡与靶膜拉在一起。 SNAREs SNAREs in vesicle transport 神经细胞中，SNAREs负责突触小泡的停泊和融合。破伤风毒素和肉毒素能选择性地降解SNAREs，阻断神经传导。 病毒融合蛋白的工作原理与SNAREs相似，介导病毒与宿主质膜的融合。 HIV fusion protein （二）Rabs 也叫targeting GTPase，属于G蛋白，起分子开关作用。已知30余种，不同膜上具有不同的Rabs。 Rabs促进和调节运输小泡的停泊和融合。 Rabs还有许多效应因子，帮助运输小泡聚集和靠近靶膜，触发SNAREs抑制因子。 Rabs in docking 五、受体介导的内吞 批量内吞（Bulk-phase endocytosis）：非特异性的摄入细胞外物质，穴样内陷（caveolae）是发生批量内吞的部位。 受体介导的内吞 (receptor mediated endocytosis)是一种选择浓缩机制。LDL、运铁蛋白、生长因子、胰岛素等都通过RME转运。 衣被小窝（coated pits）是质膜内凹的部位，相当于分子过滤器(约占肝细胞表面积2%)。受体、笼形蛋白和衔接蛋白大量集中于此处。 受体胞质端的Tyr-X-X-Φ是衔接蛋白识别的信号，X为任何氨基酸，Φ为分子较大的疏水氨基酸(如Phe、Leu、Met)。 受体同配体结合后启动内化作用，衣被开始组装。 Clathrin coated pit on the cytosolic face of a cell 低密脂蛋白的吸收： 胆固醇主要在肝细胞中合成，以低密脂蛋白（low-density lipoproteins，LDL）释放到血液。 LDL颗粒芯部含有被长链脂肪酸酯化的胆固醇分子。周围由磷脂和胆固醇构成的脂单层包围，有一个较大的Apo-B蛋白（配体）。 LDL Particle LDL endocytosis 细胞需要胆固醇时，合成LDL跨膜受体蛋白。 受体与LDL颗粒结合后，形成衣被小泡； 进入细胞质的小泡随即脱掉衣被，成为平滑小泡，同早期内体融合，内体中PH值低，使受体与LDL颗粒分离；再经晚期内体将LDL送人溶酶体。 在溶酶体中，LDL被水解成游离的胆固醇。 The receptor-mediated endocytosis of LDL LDL Endocytosis 受体回收途径： ①大部分返回原来的质膜结构域，如LDL受体； ②有些进入溶酶体被消化，如EGF的受体，称为受体下行调节（receptor down-regulation）； ③有些被运至质膜不同的结构域，形成穿胞运输（transcytosis）。 Transcytosis 六、外排作用 组成型外