【医学课件】链式聚合酶反应.pptVIP

* 聚合酶链反应技术(PCR) 【目的】 掌握聚合酶链反应技术的基本原理，学会基本操作。 了解PCR的应用。 * 聚合酶链反应（ polymerase chain reaction ）简称PCR：指在模板DNA、引物和4种脱氧核苷酸（dNTP）存在的条件下，由耐热DNA聚合酶（如Taq DNA聚合酶）在体外反复酶促合成双链DNA的反应。 【原理】 * 【原理】 * PCR反应体系的五要素：  引物、酶、dNTP、模板和Mg2+ 反应条件 反应温度和时间 循环次数 * 试 剂 实 验 管 10×Taq酶缓冲液 5 μL Mg2+（5mM） 3 μL dNTP混合液(10mM) 1 μL 引 物1(10mM) 2 μL 引 物2(10mM) 2 μL 模板DNA 2 μL 双 蒸 水 34.5 μL 取0.2mL离心管，标记，向 管底部加入下列试剂： 加入0.5μL Taq DNA聚合酶(5U/μL)，盖上盖子。 【操作】 * 一、实验目的 * 设定循环程序: 94℃ 3min 预变性 94℃ 30s 55℃ 30s 72℃ 30s 72℃ 2min 延伸 PCR反应在带热盖的PCR仪上