丹参三七组方配比优选和信息综合评价.docVIP

丹参三七组方配比优选及信息综合评价 商洪才＊ 高秀梅 郭利平 张萌 潘桂湘 张伯礼 （天津中医学院中医药研究中心，300193，天津） 摘要：配伍配比是方剂的核心与灵魂所在，是中医药的特色和优势，它既不是简单的药物作用在数量上的相加，也不是机械的毒副反应的抵消，而是在辨证立法基础上，以法统方，立方遣药，有序组合而成的有制之师。本研究以复方丹参方中的丹参、三七为对象，采用整体动物模型和离体细胞模型，对二者的配伍配比进行了优选研究，并利用数学方法对实验所得生物信息进行综合评价，得到适宜配比，为中成药的二次开发建立了一种新模式。 关键词：丹参 三七 配比优选 信息综合评价 中图分类号： 复方丹参方是经三十多年临床实践检验过的有效方剂，方中丹参为君，三七为臣，冰片为佐使。丹参和三七发挥了主要药效作用，而且两味药的临床和实验研究均具备了较深厚的基础，但目前的研究工作尚不足以解释治疗机制，其深层次的作用机理研究更少，二者的配比优选研究也未见报道，处方中的配比拟定没有科学的数据支撑，仅凭经验的积累。 丹参和三七的主要药理作用是趋向一致，还是靶点各异？丹参、三七是否有一最佳配比，最佳配比剂量是否即为药典所述？中药的最佳配比仅是一个点，还是一个阈值（范围）？为阐明本研究的核心问题，建立了基线等比增减设计方法【1】，采用整体和细胞两个层次的模型，着眼于全成分，结合药化分析，对丹参/三七的不同比例：10/0、10/1、10/3、10/6、10/10、1/10、0/10进行了多效应的药效学比较研究，同时开展了对高维数小样本多效应生物信息综合评价方法的研究，分述如下： 1 丹参三七配比优选研究 1.1整体实验部分 方法：在经典模型上加以改造，应用犬冠状动脉左前降支结扎法造成急性心肌缺血模型，并与血流动力学模型有机结合，着眼于全方组分、整体动物、多效应指标动态观察，对丹参/三七的不同比例： 10/0、10/1、10/3、10/6、10/10、1/10、0/10进行了多效应比较药效学研究。效应评价指标涉及到心外膜心电图（Σ-ST、N-ST ）、心肌组织缺血区范围、心肌生化标志物（cTnI、CK-MB）、冠脉血流量、心肌耗氧量、血流动力学、一氧化氮、内皮素、自由基等。 结果： 1.1.1丹参三七不同配比对模型犬心电及心肌组织染色的影响【2】 以丹参为主的四个药对比例组，即10/6、10/3、10/1、10/0，有明显改善犬心肌缺血的作用，减轻由心外膜心电图所标测的心肌缺血程度，减少通过TTC染色所显示的缺血区。其中尤以10/6、10/3两组作用突出。 1.1.2丹参三七不同配比对模型犬心肌生化标志物的影响【3】 以丹参为主的药对比例组对心肌钙蛋白的增高有明显的抑制作用，反映了丹参对心血管的直接作用强于三七。这与心外膜心电图、心肌染色所反映的结果基本一致。 1.1.3丹参三七不同配比对模型犬冠脉循环指标的影响 在对冠脉血流量有效增加的各组中，以丹参为主的药组（10/0、10/3、10/6）作用较强。消心痛组在给药后30min即发挥作用，但很快减弱；而中药组（10/0、10/3、10/6）作用平稳而持久、稳中有升，远后效应明显。 1.1.4丹参三七不同配比对模型犬血流动力学的影响 给药后，各中药比例组均表现出一定的作用；综合而言，10/6、10/3两组可以明显改善左室收缩及舒张功能，增加心输出量及心脏指数，减少血管总外周阻力，而左室做功没有明显增加，心率、平均动脉压的波动较小。 1.1.5丹参三七不同配比对模型犬内皮素、一氧化氮及自由基的影响 0/10组（单纯三七）既促进NO的释放、保护SOD活性，又降低ET含量、减少MDA的产生，表现出较强的生物效应。 1.1.6丹参三七不同配比对正常家兔血浆血小板聚集性、粘附性的影响【4】 对正常家兔血浆血小板聚集性和粘附性的的抑制，丹参∶三七最佳配伍不同，前者为10∶3、后者为0∶10。而10∶3抗聚集最佳，粘附抑制率排列第三，0∶10，也就是单纯三七抗聚集最差，二者兼顾最佳配伍应为10∶3。 1.2细胞实验部分【5】 方法：在正常、缺氧两种培养条件下，观察丹参、三七7种不同比例对心脏微血管内皮细胞MTT、NO、ET、LDH的影响。 结果： 1.2.1丹参三七不同配比对正常培养心脏微血管内皮细胞的影响 正常培养条件下，丹参、三七各配比组均可降低CMEC的LDH水平（均P0.01）；对于CMEC释放NO和分泌ET都有降低趋势，但无统计学意义；然而在提高细胞活力方面，单纯丹参组（10∶0组）具有显著差异，较其它组为优，从趋势来看，单纯三七组（0∶10组）无效，10∶1~10∶10均有效，但随着丹参量的减少和三七量的加大，其效果逐渐减弱。 1.2.2丹参三七不同配比对缺氧损伤心脏微血管内皮细胞的影响 在缺O2损伤