中国药科大学分子生物学期末复习重点分章整理精要.docVIP

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第2章 可移动的遗传因子 1 转座子是谁最早从什么物种中发现的? 麦克林托克(Barbara McClintock); 玉米 2 掌握转座子的概念和分布。 概念:细胞内的可移动遗传因子,指可以在同一细胞中基因组内或一个细胞的基因组从一 个位点移动到另一位点的DNA片断。(广义的概念,凡是细胞内可以移动的因子, 都 叫转座子) 分布:病毒、真核生物、原核生物(质粒基因组) 3 掌握转座子的分类和各类的特点。 非复制型转座:转座时,转座子DNA作为一个整体,从原来的供体位置被切割下来,然后转移到染色体的另外一个位置。 复制型转座:转座时,原来的转座子DNA不从原来的位置被切割下来,而是在转座的过程中原来的转座子DNA得到复制,并转移到染色体的另外的地方。原来的拷贝“原件”没有发生位移。 逆转录转座子:将转座的片段转录成RNA,再通过逆转录酶将RNA反转录成cDNA,插入寄主染色体中。 4 所有转座子都具有的结构特征和共同特点是什么? 转座子都具有的结构特征:都有一个保守序列、一个或多个开放阅读框,两侧是反向末端重复序列(反向重复序列为转座子所必须,是转座酶识别的底物) 共同特点: 1 两端具有末端反向重复序列 2 转座后靶位点重复是正向重复 3 编码一些与转座有关的蛋白 4 可以在基因组中移动 5 最简单的转座子的结构特征。 最简单的转座子 :不含有任何的宿主基因,常被称为插入序列(IS),这种插入序列是细菌染色体或质粒DNA的正常组成部分。 IS的结构特征:DNA的两个末端是反向重复序列(又称倒置重复序列),中间是一个阅读框,编码一个与转座有关的转座酶基因。除此之外,IS序列中没有其他的基因。 6 什么是复合转座子。 复合转座子的概念:是一类比较复杂的转座子, 带有一些抗药性基因或其他宿主基因,其两端多数是高度同源的或相同的IS序列(反向重复区)(少数是正向重复序列)。 PS: IS序列插到某个功能基因的两端就产生了复合转座子。复合转座子中的IS序列不能单独自由移动,其功能已经被修饰,只能和复合体一起移动。7 TnA家族转座子具有什么特点? TnA转座子的特点: 1. 末端没有IS序列,而是一个38 bp的反向重复序列; 2. 体积一般较大(5000 bp以上); 3. 转座子带有3个基因,其中一个编码β-内酰胺酶(AmpR),其他两个是转座作用必须的转座酶和解离酶。复制型转座 8 为什么转座子的插入位点两端都有同向重复序列? 同向重复序列存在原因:   转座时有一个普遍的特征就是受体分子中有一段很短(3-12 bp)、被称为靶序列的DNA会被复制一次,插入的转座子就位于两个重复的靶序列之间。这种靶序列的同向重复序列是由于某种限制型内切酶的切割造成的。   IS转座先由转座酶交错切开宿主靶位点,然后IS插入连接,余下的缺口由DNA聚合酶和连接酶加以填补,使两端形成短的同向重复序列,IS转座后的特征结构是:末端是反向重复序列,临近末端的旁侧则有宿主DNA的短的正向重复序列。(转座酶具有限制性内切酶活性,不同转座酶切割形成的粘性末端不同)    9 原核细胞中的转座因子有哪些常见的类型?各自特点? 原核细胞中的转座因子: 插入序列 (IS): 1. 是最简单的转座子,是细菌基因组DNA中的正常组分。其两端都有反向重复序列(为转座酶识别所需;重复序列只是类似,并非完全相同),中间的编码区长度为1000 bp左右,只编码转座酶,除此之外无其他任何基因 2. 对靶点的选择有几种方式:随即选择,热点选择和特异位点选择。 类插入序列(只存在于转座子中的插入序列称为类IS因子): 1. 这类转座子不单独存在,而是存在于复合转座子的两端。 2. 经过修饰,已经不能够单独移动了,只能和复合转座子的其他成分一起移动。 3. 结构和IS类似,如IS10R、IS50R等。PS: 类IS序列与IS序列最根本的区别是,类IS序列只存在于复合转座子的两端,但不可自身转座,原因是它失去了编码自身转座酶的能力复合转座子: 1. 比IS长的多,中心区域编码抗生素基因或其他宿主基因。 2. 两端的组件由IS和类IS组成,有的两端组件相同,有的不同,有的反向相反,有的方向相同,有的两个组件均有功能,有的只有一个有功能。 TnA家族: 1. 这类家族长度约为5000 bp,两端具有IR(反向重复),而不是IS。 2. 中部的基因不仅编码抗性基因,还编码转座酶和解离酶。这是一种复制型转座子。末端反向重复长度是38 bp,产生的靶位点是5 bp的正向重复。 10 玉米中的最常见的转座子系统是什么? Ac/Ds系统 (激活-解离系统) : 激活因子Ac和解离因子Ds属于同一家

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