生化全面质量控制及试剂盒的选择与评价教案分析.pptVIP

二、其它类型试剂 （一）快速反应试剂盒 如血液葡萄糖快速测定试剂盒。 （二）一步法试剂盒 如直接测定出高密度胆固醇。 （三）多项同测组合试剂盒 （四）卡式试剂盒 （五）浓缩试剂盒 液体双试剂盒的特点 （一）提高了抗干扰反应的能力 （二）使测定更科学合理 （三）稳定性能优良 （四）试剂组分高度均一 第二节 临床生化诊断试剂的制备 诊断试剂（包括标准品）的质量是影响分析质量的一个主要因素，因而在试剂研制生产过程中推行标准化的要求是保证试剂质量的关键所在。 一、标准品的制备 1．必备的主要条件 ①纯度高；②定值准确可靠；③稳定性好，在保管、使用有效期内其示值误差不超出证书的许可范围；④均一性好，任何一份分装的小样品都具备整个标准物质的特性指标。 2．附加条件 ①摩尔质量尽可能大；②具有符合使用目的之反应特性；③制造简便，价格低廉，购买方便；④标准物质的组成若发生变化（如吸潮）时，可采用重新干燥（恒重）等措施使其复原。 （二）标准液的配制 2．标准液的质量鉴定 不论是实验室自行配制或厂家生产的标准液，都需要认真地按照国家卫生部的规定做好质量检定。提出的规范化的要求和质量检定标准，并在标准液制备过程中应该严格检定程序，使其达到质量标准。 1．标准液配制的依据 供临床生化常规测定用的标准液属于二级标准物质，其示值的准确性对检验质量有重大影响，必须在标准物质选择、恒重方法程序、基质（包括水）的质量、最优化的配方和制备工艺上都要严格按照我国卫生部医政司主持编写修订的《全国临床检验操作规程》（1997年5月，第二版）的要求进行。 （三）标准液的正确使用 1．应采购诊断试剂正规生产厂家生产的商品标准液，尤其有国家卫生部生产文号的产品。2．一瓶标准液只能使用一次，避免反复冻融、反复使用，尤其是标准物质稳定性较差的标准液（如尿素、葡萄糖、胆红素、白蛋白等）以及标准液的基质易挥发的标准液（如用无水乙醇配制的胆固醇标准液等）更应注意。3．定值质控血清只能用于临床生化室内质量控制及室间质量评价，不能用作常规分析的标准物质，也不能用于相应物质含量的标化或仪器分析性能准确性的评价。4．按照各种标准液不同保存条件妥善保管，并在其有效期内使用。 二、试剂中常用工具酶的质量保证 （一）工具酶的概念  工具酶是指作为诊断试剂来测定化合物浓度或酶活性的一类酶。它是酶试剂的核心，它的质量是酶试剂质量的决定性因素。在临床生化领域里，目前已设计出几百种酶试剂系统和测定方法，用于200多个临床生化检验项目，使酶试剂方法成为最有发展前途的分析方法。可以预见，在不远的将来，现有的临床生化分析方法将基本上被酶试剂方法所取代。 （二）工具酶的来源和理化特性 临床生化酶试剂中的工具酶主要来自动植物组织提取及微生物发酵工程。在早期，酶多由含酶丰富的动植物组织提取；在当代，除了脲酶、过氧化物酶、乳酸脱氢酶等分别由豆类种子、辣根和心肌中提取外，工具酶主要依赖微生物发酵工程获得。微生物发酵工程包括高产酶菌种的筛选、放大培养和酶提取纯化三个部分。 不同来源的同一种工具酶有不同的理化特性。为了更有效地发挥工具酶的催化效能，形成最佳的酶试剂配方，必须确切地掌握该酶对底物的专一性、分子量、等电点、Km、最适pH、最适温度等理化特性参数，并熟悉辅助因子、激活剂和抑制剂对酶活性的影响。 （三）工具酶的纯度要求 不同的酶试剂系统对工具酶的纯度有不同的要求。以NADH的生成或减少作为指示反应的测定系统中，由于组织匀浆中往往含有NADH-细胞色素C还原酶，它将消耗NADH而出现干扰反应，因此要求该测定系统的工具酶有较高的纯度。而在Trinder反应中，由于人体液中氧化酶较少，产生副反应的机会较少，因此对测定系统中工具酶的纯度要求相对低一些。衡量工具酶纯度的要求指标是： 1．酶的比活性 酶的比活性是评价酶纯度的最好标准，即每毫克（酶）蛋白所具有的酶活性（U/mg）。酶的比活性越高，酶的纯度越高。一般要用推荐的酶活性测定方法测定。 2．杂酶含量 为了兼顾工具酶的较低生产成本和保证酶试剂质量，对工具酶中容易引起副反应的其他酶（即所谓杂酶）含量提出了允许限度的要求（见表6-2），但是目前尚未有国家卫生部或中华医学检验学会的推荐标准。 三、缓冲液的配制 （一）缓冲液的组成  缓冲液是临床生化诊断试剂的重要组成部分。由于它对外来的H+和OH-有双向调节作用，因而能为酶试剂中的待测物质反应提供最适pH，以利于这些酶最大限度地发挥其催化效能；也为以酸碱指示染料作为显色剂的试剂提供稳定的pH环境，以保证这些试剂和方法有准确可靠的测定结果。 一般的缓冲剂都由一共轭酸及一共轭碱组成。酸性