第十一章吸光光度法,解决方案.pptVIP

第十章 吸光光度法 1 吸光光度法的基本原理 2 光度分析的方法和仪器 3 吸光光度法的灵敏度与准确度 4 显色反应与分析条件的选择 5 吸光光度法的应用 化学分析：常量组分(1%), Er : 0.1%～0.2% 准确度高 依据化学反应, 使用玻璃仪器 特点 灵敏度高：测定下限可达10-5～10 -6mol·L-1, 10-4%～10-5% 准确度能够满足微量组分的测定要求： 相对误差2～5％ （1～2％） 操作简便快速 应用广泛 一 光的基本性质 (电磁波的波粒二象性) c －真空中光速 2108m/s ~3.0 ×108m/s ?－波长，单位：m,cm,mm,?m,nm,? 1?m=10-6m, 1nm=10-9m, 1?=10-10m ? －频率，单位：赫兹(周)Hz 次/秒 n －折射率，真空中为1 h－普朗克(Planck)常数 6.626×10-34J·s ?－频率 E－光量子具有的能量 单位：J(焦耳)，eV(电子伏特) 1eV=1.602×10－19 J 结论:一定波长的光具有一定的能量，波长越 长(频率越低)，光量子的能量越低. 单色光：具有相同能量(相同波长)的光. 混合光：具有不同能量(不同波长)的光复合在 一起. 例如白光. 电磁波谱及分析方法 光学光谱区 二 物质对光的吸收与发射 不同物质吸收光谱的形状以及?max 不同 ——定性分析的基础 同一物质，浓度不同时，吸收光谱的形状相同，Amax 不同 ——定量分析的基础 第二节 光吸收的基本原理 一、Lamber-Beer定律 二、吸光系数和吸收光谱 三、偏离Beer定律的因素 四、透光率的测量误差 一、Lamber-Beer定律：吸收光谱法基本定律 描述物质对单色光吸收强弱与液层厚度和待测物浓度的关系 假设一束平行单色光通过一个吸光物体 朗伯-比尔定律 意义: 当一束平行单色光通过均匀、透明的吸光介质时，其吸光度与吸光质点的浓度和吸收层厚度的乘积成正比. 续前 讨论： 1．Lamber-Beer定律的适用条件（前提） 入射光为单色光 溶液是稀溶液 2．该定律适用于固体、液体和气体样品 3．在同一波长下，各组分吸光度具有加和性 应用：多组分测定 二、吸光系数和桑德尔灵敏度 1．吸光系数的物理意义： 单位浓度、单位厚度的吸光度 讨论： 1）K=f（组分性质，温度，溶剂，λ） 当组分性质、温度和溶剂一定，K=f（λ） 2）不同物质在同一波长下K可能不同（选择性吸收） 同一物质在不同波长下K一定不同 3）K↑，物质对光吸收能力↑, 定量测定灵敏度↑ → 定性、定量依据 续前 2．吸光系数两种表示法： 1）摩尔吸光系数a： A= abc 在一定λ下，C=1g /L，b=1cm时的吸光度 单位为：L/g cm 2）摩尔吸光系数κ ：A = κbc 在一定λ下，C=1mol/ L，b=1cm时的吸光度 单位：L / mol cm 3）两者关系 κ= a M 3. Sandell(桑德尔)灵敏度 (S) 定义：截面积为1cm2的液层在一定波长或波段处，测得吸光度为0.001时所含物质的量。 用S表示，单位：?g·cm-2 A= κ bc=0.001 bc ＝0.001/ κ 例1 邻二氮菲光度法测铁?(Fe)=1.0mg/L,  b=2cm , A=0.38 计算k 、S 解： c(Fe)=1.0 mg/L=1.0×10-3/55.85 =1.8×10-5(mol·L-1) 例2 比较用以下两种方法测Fe的灵敏度. B. 用4,7-二苯基邻二氮菲光度法测定铁 k533＝2.2×104 L·mol-1·cm-1 S = 55.85/(2.2×104)＝0.0025 (?g·cm-2) B方法比A方法的灵敏度高. 续前 4．标准曲线法 示例 芦丁含量测定 续前 5．吸光度测量的条件选择： 1）测量波长的选择： 2）吸光度读数范围的选择： 3）参比溶液(空白溶液)的选择： 三、引起偏离朗伯-比尔定律的因素 依据Beer定律，A与C关系应为 经过原点的直线 偏离Beer定律的主要因素表现为 以下两个方面 （一）光学因素 （二）化学因素 （一）光学因素