第十二章光度分析(好)解决方案.pptVIP

第十二章 光度分析法 本章需要掌握的内容和解决的问题： 一、问题 1、光度分析法的显色反应的条件？显色反应的影响因素？ 2、偏离朗伯比尔定律的原因？ 3、光度分析的参比溶液的选择？测定的误差较小的范围是多少？ 4、吸光光度法的仪器有几大部件组成？ 二、计算 1、朗伯比尔定律的（1）三个公式计算： A=abc、A=εbc、A=lgT （2）比较法: 4.吸光光度法的灵敏度的表示方法 3. 显色条件的确定 单波长双光束分光光度计 定量分析时，通常液层厚度是相同的，按照比尔定律，浓度与吸光度之间的关系应该是一条通过直角坐标原点的直线。但在实际工作中，往往会偏离线性而发生弯曲。 五、偏离朗伯一比尔定律的原因 0 1 2 3 4 mg/mL A 。 。 。 。 * 0.8 0.6 0.4 0.2 0 工作曲线 标准曲线法测定未知溶液的浓度时，发现：标准曲线常发生弯曲（尤其当溶液浓度较高时），这种现象称为对朗伯—比耳定律的偏离。 引起这种偏离的因素（两大类）： （1）物理性因素，即仪器的非理想引起的； （2）化学性因素。 单色光不纯，导致负偏差。散射光的影响，胶体、乳浊液或悬浊液由于散射的作用使吸光度增大，或入射光不是垂直通过比色皿（非平行入射光）产生正偏差 为克服非单色光引起的偏离，首先应选择比较好的单色器此外还应将入射波长选定在待测物质的最大吸收波长且吸收曲线较平坦处。 （1）物理性因素 (2) 化学性因素 吸光质点的相互作用，浓度较大时，产生负偏差， 朗伯-比尔定律只适合于稀溶液（C 10-2 mol/L )。 平衡效应：溶液中存在着离解、聚合、互变异构、配合物的形成等化学平衡时。使吸光质点的浓度发生变化，影响吸光度。 例： 铬酸盐或重铬酸盐溶液中存在下列平衡： CrO42- ＋2H＋ = Cr2O72- ＋H2O 溶液中CrO42-、 Cr2O72-的颜色不同，吸光性质也不相同。故此时溶液pH 对测定有重要影响。 六、 吸光光度分析的方法和仪器 吸光分析是根据物质对光的选择性吸收为基础，以朗伯-比尔定律为依据的分析方法。按照测定原理、操作特点以及使用的一起又分目视比色法、光电比色法和分光光度法。 1. 目视比色法 colorimetry 用眼睛观察、比较溶液颜色深度以确定物质含量的方法。优点是仪器简单，操作简便，适宜于大批试样的分析。灵敏度高，因为是在复合光-白光下进行测定，故某些显色反应不符合朗伯-比尔定律时，仍可用该法进行测定。主要缺点是准确度不高，标准系列不能久存，需要在测定时临时配制。 目视比色法 标准系列 未知样品 特点 利用自然光 比较吸收光的互补色光 准确度低(半定量) 不可分辨多组分 方法简便，灵敏度高 观察方向 2. 光电比色法(colorimetry) 光电比色法是利用光电池和检流计代替人眼，测定吸光物质对某一波长的光的吸收来进行测定方法。 光电比色计是通过滤光片(filter)得一窄范围的光(几十nm)，即单色光为光源，但单色光的单色性不好，常发生偏离郎伯-比尔定律的情况。 灵敏度和准确度较差 ( photoelectric colorimeter) 3. 吸光光度法 Spectrophotometry 借助分光光度计来测量一系列标准溶液的吸光度，绘制标准曲线，根据被测试液的吸光度，从标准曲线上求得被测物质的浓度或含量。Standard curve *吸光光度法特点：入射光是纯度较高的单色光，故便偏离朗伯-比尔定律的情况大为减少，标准曲线直线部分的范围更大，分析结果的准确度较高。因可任意选取某种波长的单色光，故利用吸光度的加和性，同时测定溶液中两种或两种以上的组分。由于入射光的波长范围扩大了，许多无色物质，只要它们在紫外或红外光区域内有吸收峰，都可以测定。 通过棱镜或光栅得到一束近似的单色光.波长可调, 故选择性好, 准确度高. 分光光度法 仪器 分光光度计按工作波长范围分类：紫外、可见分光光度计应用于无机物和有机物含量的测定，红外分光光度计主要用于结构分析。分光光度计又可分为单光束和双光束两类。722型分光光度计是数字显示的单光束、可见分光光度计(recording spectrophotometer)。 检测系统 吸收池 光源 单色器