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概 念 灭菌(sterilization) 杀灭所有的微生物,包括细菌的芽孢; 消毒(disinfection) 杀灭病原微生物; 防腐(antiseptic) 抑制微生物的生长繁殖; 化学疗剂(therapeutic agents) 用来治疗微生物感染的药物,具有选择毒性; 控制微生物的物理方法 滤过除菌 热力灭菌法 辐射 超声波(ultrasonic) 渗透压(osmotic pressure) 细菌滤器—材料为玻璃棉,陶瓷,石棉等。 滤膜 材料为醋酸纤维素,硝酸纤维素,聚砜; 孔径为0.22微米,0.45微米; 应用—啤酒,饮料,药物(对热不稳定的,如蛋白质等)。 多数细菌,酵母菌和霉菌的营养细胞和病毒在50-65 ℃, 10 min可以致死。 一般噬菌体65-80 oC致死。 放线菌霉菌的孢子比营养细胞抗热性强,76-80 ℃,10min可以杀死 。 细菌芽孢,在100 ℃下5-20min才能致死。 嗜热脂肪芽孢杆菌可在80 ℃条件下失活,在120 ℃ ,12min才能杀死。 同种微生物老龄菌比幼菌耐热。 干热灭菌法 湿热灭菌法 焚烧 金属制品(镊子,接种环等)。 动物尸体,废弃物。 干热灭菌 160℃/2h(oven)烤箱。适用于耐高温物品。 温度下降至90~100℃时方可开启箱门,否则干烤物品会骤冷,破碎或可燃物燃烧。 湿热灭菌比干热灭菌效果好 水蒸气穿透力强 水蒸气含热潜能高 蛋白质易凝固变性 巴氏消毒法 煮沸法 流通蒸汽灭菌法 间隙灭菌法 高压蒸汽灭菌法 (高温对培养基的影响及其防止措施) 物品在水中煮沸 15min,可杀死所有营养细胞和一部分芽孢。 在水中加入1%的 Na2CO3或2-5%的碳酸效果更好。此法适合注射器和解剖用具的消毒。 低温维持法(LTH) 63℃/30min 高温瞬时法(HTST) 72℃/15s,82℃/3s。 设备:灭菌锅(autoclave) 灭菌条件 113℃/115℃(8磅/10磅)20~30min,适用于含糖培养基。 121℃ (15磅)20~30min,一般耐高温物品。 紫外线 X—Ray、?—射线、γ—射线 原理—细胞DNA吸收能量,形成胸腺嘧啶二聚体,干扰DNA复制和蛋白质合成。 设备:紫外灯(30~40W) 适用于空间及物品表面的消毒 缺点:穿透力弱,不能透过玻璃,UV照射可产生臭氧(有害)。 适用于整包装灭菌( Co 60) 优点:穿透力强 破碎细胞 (eg:E.coli,有时与溶菌酶反复冻溶结合) 超声波清洗(细胞培养用玻璃器皿) 高渗引起细胞脱水产生质壁分离。 常用盐腌,糖渍来保存食品。 常用消毒剂的种类和应用 影响消毒剂作用的因素 消毒剂的性质和作用方式 微生物种类 消毒剂的浓度、作用时间 环境因素 * * 高温对培养基的不利影响: 形成沉淀物(有机沉淀物如多肽类,无机沉淀物如磷酸盐);破坏营养;提高色泽(褐变如产生氨基糖等);改变培养基的pH值;降低培养基的浓度 消除有害影响的措施 采用特殊的加热灭菌法 过滤除菌法 加入螯合剂 是用常压蒸汽反复几次进行灭菌的方法。 主要用于不宜高压灭菌的培养基,不耐热的药物和营养物等 方法是将待灭菌物品置于蒸锅内加热到沸腾维持15-30min,杀死营养细胞,取出冷却后在37oC恒温培养24小时,使芽孢萌发,再用此法灭菌,反复三次,即可达到灭菌目的。 是食品(牛奶)酿造(啤酒)工业中常用的方法。 具体做法 优点:即可杀死病原微生物。又不致损坏营养,可保留食品饮料原有用味。 消毒剂 可以抑制或杀灭微生物,但对人体也可能产生有害作用的化学试剂.—主要用于抑制或杀灭物体表面、器械、排泄物和环境中的微生物。 防腐剂 可以抑制或阻止微生物生长,但对人体或动物体的毒性较低的化学药剂.——用于肌体表面,如皮肤、粘膜、伤口等处防止感染,也有的用于食品、饮料药品的防腐作用。 但现时消毒剂和防腐剂间的界限已并不很严格. 控制微生物的化学方法 使微生物蛋白质凝固变性,发生沉淀.如酒精等. 破坏菌体的酶系统,影响菌体代谢.如过氧化氢等. 降低微生物表面张力,增加细胞膜的通透性,使细胞发生破裂或溶解.如来苏儿等酚类物质. 消毒防腐剂的作用机理 应用范围 作用原理 名称及使用方法 类型 皮肤、粘膜、器械 皮肤、金属、棉织品、塑料 蛋白变性、破坏细胞膜 0
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