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人类对病毒的发现和认识过程 总体上,动物病毒以线状的dsDNA和ssRNA为多,植物病毒以ssRNA为主,噬菌体以线状的dsDNA居多,真菌病毒多为dsRNA。 烈性噬菌体的繁殖 双层平板法 病毒的特点、结构与对称体制 个体微小,电子显微镜下可见 结构简单 无细胞结构 成分为蛋白质和核酸(DNA或RNA) 严格寄生(无产酶及合成系统) 对抗生素不敏感,对干扰素敏感 独特的繁殖方式——复制(增殖) 烈性噬菌体的繁殖 溶源菌的检验方法: 多为ssRNA 基本形态:杆状、丝状、球状 对宿主的专一性差 引起宿主植物的三类明显症状:叶绿素合成受损;植物矮化、丛枝或畸形;叶上形成枯斑或坏死。 小结 病毒的概念与内含 病毒的形态与结构 病毒的繁殖过程 亚病毒(类病毒、拟病毒、朊病毒) 病毒与人类实践的关系 思考题 查阅相关资料论述病毒与人类的关系。 要防治噬茵体的危害,首先是提高有关工作人员的思想认识,建立“防重于治”的观念。 1)决不使用可疑菌种 认真检查斜面、摇瓶及种子罐所使用的茵种,坚决废弃 任何可疑菌种。 2)严格保持环境卫生。 3)注意通气质量 空气过滤器要保证质量并经常进行严格灭菌,空气压缩机的取风口应设在30~40米高空。 2、预防噬菌体污染的措施 4)决不排放或随便丢弃活菌液 环境中存在活菌,就意味着存在噬菌体赖以增殖的大量宿主,其后果将是极其严重的。为此,摇瓶菌液、种子液、检验液和发酵后的苗液绝对不能随便丢弃或排放,正常发酵液或污染噬茁体后的发酵液均应严格灭菌后才能排放;发酵耀的排气或逃液均须经消毒、灭菌后才能排放。 5)加强管道及发酵罐的灭菌。 6)不断筛选抗性菌种,并经常轮换生产茵种, 7)严格执行会客制度。 如果预防不成,发现噬菌体污染时,可采取措施: 1)尽快提取产品。如果发现污染时发酵液中的代谢产物含量已较高,即应及时提取或补加营养并接种抗噬菌体菌种后再继续发酵,以挽回损失; 2)使用药物抑制。目前防治噬菌体污染的药物还很有限.在谷氨酸发酵中,加入某些金属螯合剂(如0.3-0.5%草酸盐、柠檬酸铵)可抑制噬茵体的吸附和浸入;加入1-2 μg/ml金霉素、四环素或氯霉素等抗生素或0.1-0.2%的 “吐温20”、“吐温80”或聚氧乙烯烷基醚等表面活性剂均可抑制噬茵体的增殖或吸附; 3)及时改用抗噬菌体生产菌株。 10 100 1000 10000 10 20 30 40 50 潜伏期 裂解期 平稳期 隐晦期 胞内累积期 噬菌斑数/cm3 感染后时间(min) T4噬菌体的一步生长曲线 人为裂解 自然裂解 裂解量=21000/100 =210噬菌体/细菌 4、溶源性(lysogeny) 温和噬菌体(temperate phage)或称溶源性噬菌体(lysogenic phage):感染宿主细胞后不能完成复制循环,噬菌体基因组长期存在于宿主细胞内,没有成熟噬菌体产生。这一现象称做溶源性(lysogeny)现象。 温和噬菌体的3种存在形式:游离态、整合态、营养态 前噬菌体:附着或融合在溶源性细菌染色体上的温和噬菌体的核酸称为原噬菌体或前噬菌体。 ★温和噬菌体在细菌染色体上的整合位置: 就目前所知,所有温和噬菌体的核酸都是双链DNA。按照温和噬菌体DNA与细菌DNA结合部位的不同,又可将其分成两类: ①只有一个特定结合部位的温和噬菌体: 如: 大肠杆菌的 ? 噬菌体 ②具有多个或不定部位的温和噬菌体: 如: 大肠杆菌的P1噬菌体 鼠伤寒沙门氏菌 P22 噬菌体 。 烈性噬菌体(virulent phage): 感染宿主细胞后能在细胞内正常复制并最终杀死细胞,形成裂解循环(lytic cycle)。 在大多数情况下,温和噬菌体的基因组都整合于宿主染色 体中(如λ噬菌体),亦有少数是以质粒形成存在(如P1噬菌体)。 裂解性循环与溶源性循环的相互关系 6、噬菌体的生活史 整合于细菌染色体或以质粒形成存在的温和噬菌体 基因组称做原噬菌体(prophage) 在原噬菌体阶段,噬菌体的复制被抑制,宿主细胞 正常地生长繁殖,而噬菌体基因组与宿主细菌染色 体同步复制,并随细胞分裂而传递给子代细胞。 细胞中含有以原噬菌体状态存在的温和噬菌体基因组 的细菌称做溶源性细菌(lysogenic ba
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