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zzplovezzp 小组成员： 李亚 雷文丽 刘苗 张雪艳 抗体库技术的应用 ——抗体亲和力的提高 TEXT 01 A TEXT 02 B TEXT 03 C TEXT 04 D 抗体亲和力的提高 ?亲和力是抗体的重要生物参数，在生物技术领域，亲和 力高的抗体有更高的使用价值，因此对抗体亲和力的提 高是备受人们关注的课题 A 抗体亲和力的提高 对于抗体亲和力的提高，一般针对两个方向 ?体内抗体亲和成熟 ?体外抗体亲和成熟 体内抗体亲和成熟 亲和力成熟：在体内除此反应产生的抗体一般亲和力较低，在随后的抗原刺激下，抗体可变区基因发生的体细胞突变，造成亲和力的改变，亲和力提高的变种具有选择优势，最后形成产生高亲和力抗体的B细胞克隆。 （点突变） α 体外抗体亲和成熟 ?在体外可以用抗体库技术模拟体内的亲和力成熟过程提高抗体的亲和力。 （多策略引入突变） β β 突变策略 PCR错配 A B C 链替换 D 利用致突变株大肠杆菌在细胞内进行突变 人工合成寡核苷酸 目录 contents A PCR错配 ?TaqDNA聚合酶缺乏3→5的外切酶活性，在DNA合成 过程中没有校正功能 ?改变PCR的条件，比如加入锰离子，减少脱氧三磷酸 腺苷的浓度，使错配率提升 ?因此，通过高错配倾向PCR扩增，对可变区进行随 机突变，构建次级突变库 目录 contents B 利用致突变株大肠杆菌在细胞内进行突变 ?mutD5菌株，它由于遗传缺陷而存在较高的突变率 ?在DNA复制中错配修复功能缺陷 ?聚合酶缺乏3→5的校正性外切酶活性 使得突变率较正常菌株高1000倍以上，因此将携带有抗体可 变区基因的载体转化到致突变大肠杆菌中培养一段时间，得 到次级突变库 C 人工合成寡核苷酸 点击添加文本 点击添加文本 点击添加文本 点击添加标题 Text 1 Text 2 Text 3 TEXT 03 C 目录 contents TEXT 01 A TEXT 02 B TEXT 03 C TEXT 04 D 目录 contents TEXT 01 A TEXT 02 B TEXT 03 C TEXT 04 D 西部牛仔（West cowboy），是指18至19世纪的美国，在西部广袤的土地，一群热情无畏的开拓者。在美国历史上，他们是开发西部的先锋，他们富有冒险和吃苦耐劳精神，因此被美国人称为“马背上的英雄”。 @单击更换文本 西部牛仔（West cowboy），是指18至19世纪的美国，在西部广袤的土地，一群热情无畏的开拓者。在美国历史上，他们是开发西部的先锋，他们富有冒险和吃苦耐劳精神，因此被美国人称为“马背上的英雄”。 @单击更换文本 TEXT 04 D 西部牛仔（West cowboy），是指18至19世纪的美国，在西部广袤的土地，一群热情无畏的开拓者。在美国历史上，他们是开发西部的先锋，他们富有冒险和吃苦耐劳精神，因此被美国人称为“马背上的英雄”。 @单击更换文本 TEXT 04 D 目录 contents TEXT 01 A TEXT 02 B TEXT 03 C TEXT 04 D zzplovezzp
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