分子生物学在保护野生动物中的应用.docVIP

分子生物学技术在保护野生动物方面的应用 野生动物是生态系统中活跃的、引人注目的组成部分，具有重要的生态服务功能,对于保护生物多样性、维持生态平衡具有重要作用。开展野生动物的保护和研究对人类社会也具有深远的意义。目前，野生动物的保护研究中较多注重关注宏观、外在的现象，广泛应用宏观的、描述性的研究手段，而对分子生态的内在机理方面仍涉足较少。物种内在分子机理是起源、进化或灭绝的重要内因，只有搞清楚内部的机制、机理，结合外因一起分析，才能掌握生物变化的本质　。近几十年来，由于分子生物学技术的迅速发展，各种分子技术趋于成熟。野生动物的保护研究开始涉足到分子水平，蛋白质和ＤＮＡ水平上的多样性研究取得了突破性进展，其中遗传标记Genetic marker）具有非常重要的地位。它的发展过程可分为形态标记　（Morphological marker）、细胞标记　（Cytological marker）、生化标记　（Biochemical marker）和分子标记　（Molecular marker４个阶段。前３种是基因表达型的标记，是对基因的间接反映，标记数目有限，可利用的多态位点较少，易受环境影响，不能满足物种资源鉴定的需要。直到１９８０年，美国学者Botstein提出用ＤＮＡ限制性内切酶片段长度多态性（ＰＦＬＰ）作为遗传标记，开创了直接应用ＤＮＡ多态性发展遗传标记的新阶段。与前３种遗传标记不同的是分子标记直接在ＤＮＡ分子上检测生物间的差异，是在ＤＮＡ水平上遗传变异的直接反映。２０世纪８０年代ＤＮＡ聚合酶链式反应（ＰｃＲ）技术的出现，又推动了许多新型的分子标记，如　ＲＡＰＤ标记、ＳＳＲ标记等技术的发展。 １.分子标记技术概述　 分子标记技术及其优势　 分子标记技术是分子生物学发展的产物，指反映生物个体或群体间在基因组上某种差异特征的ＤＮＡ片段，是继形态标记、细胞标记和生化标记之后发展起来的一种较为理想的遗传标记形式。分子标记技术从本质上讲，都是以检测生物个体在基因或基因型上所产生的变异来反映生物个体之间的差异。每一种分子标记都有其自身的特点和特定的应用范围，但就一般意义而言，ＤＮＡ分子标记与表型标记等相比，具有以下优势　“　(１)直接以ＤＮＡ的形式表现，不受组织类别、发育阶段等影响，不受基因表达与否的限制；（２）不受环境影响。因为环境只影响基因表达，而不改变基因结构即ＤＮＡ的核苷酸序列;（３）标记数量多，遍及整个基因　组；（４）多态性高，自然存在许多等位变异，不需专门创造特殊的遗传材料；（５）有许多标记表现为共显性,能够鉴别纯合基因型和杂合基因型，提供完整的遗传信息；（６）技术简单、快速、易于自动化：（７）提取的ＤＮＡ样品在适宜条件下可长期保存，这对于进行追溯性或仲裁性鉴定非常有利。正是由于ＤＮＡ分子标记这些特性，奠定了它具有广泛应用性的基础。　分子标记技术在野生动物保护研究中的应用　 ２．１　种群遗传结构分析　 遗传结构是指基因或基因型在空间和时间上的非随机分布，种群的遗传结构包括种群内的遗传变异和种群间的遗传分化。对遗传结构及其影响因子的研究是探讨生物适应意义、物种形成过程及其进化机制的基础。野生动物保护的关键是保护物种的遗传多样性或进化潜力，因此，制定有效的保护策略和措施必须建立在对遗传结构充分了解的基础上。ＤＮＡ分子标记技术有助于从本质上揭示物种遗传变异及其规律，预测物种白勺命运，从而制定相应的保护管理措施，现已成为种群遗传结构研究中有力手段之一。 ２．２　亲缘关系鉴定和系统分类　 多种野生动物在野外生存的个体数量已相当稀少,为保护这些珍稀物种不至于灭绝，对其进行人工饲养和繁殖是一种有效的途径。但实行人工繁殖后面临的新问题是种群过小所导致的近交衰退。为避免后代中可能存在的近亲交配，建立可靠的遗传谱系和制定科学的繁殖策略需要鉴定个体间的不明亲缘关系¨。分子标记的发展为研究物种亲缘关系和系统分类提供了有力的手段,通过对随机分布于整个基因组的分子标记的多态性进行比较，就能够全面评估研究对象的多样性，并揭示其遗传本质。利用遗传多样性的结果可以对物种进行聚类分析，进而了解其系统发育与亲缘关系。张亚平等用微卫星标记对１３只人工饲养的大熊猫（iluiopodidae melanoleuca）进行了亲缘关系分析，得出了繁殖能力较强的父本个体。这对于大熊猫人工繁殖过程中选择有效雄性个体及理想配对方案都十分必要。张于光等用家猫（Felis catus）和　 苏门答腊虎　（Panthera tigris sumatrae）的１０对微卫星引　物鉴定了东北虎　（Panthera tigris silia中７个父子关系不清的后代，这一结果为日后制定科学的繁殖保护策略提供了可靠依据。李淑玲等利用ＡＦＬＰ分子标记,构建了丹顶鹤　（Grusjaponesis）亲缘关系