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生化工程 本科目教学计划 第一章 培养基灭菌(3课时) 第二章 空气除菌(3-4课时) 第三章 通气与搅拌(3课时) 第四章 发酵罐的比拟放大(3-4课时) 第五章 固定化酶、固定化细胞(3-4课时) 第六、七章(2-3课时) 第八章 微生物生化反应过程的质量和能量衡算(4课时) 第九、十章 (2-3课时) 讲解重难点习题(2-3课时) 生化工程 第一章 培养基灭菌 本章主要内容 第一节 分批灭菌 第二节 连续灭菌 第一节??? 分批灭菌 湿热灭菌:直接用高温蒸汽灭菌。蒸汽在冷凝时释放出大量潜能,并且蒸汽具有强大穿透力,蒸汽的湿热破坏菌体蛋白质和核酸的化学键,使酶失活,微生物因代谢障而死亡。 湿热灭菌的效果,取决与致死温度和致死时间。 致死温度:杀灭微生物的极限温度。 致死时间:在致死温度下杀灭全部微生物所需时间 ? 一、微生物的热死灭动力学 对培养基进行湿热灭菌时,培养基中的微生物受热死亡(微生物体内蛋白质变性)的速率与残存的微生物数量成正比。 比热死速率常数K 取决于菌体抗热性能 明显的受灭菌温度T的影响 温度达到120摄氏度时,嗜热芽孢杆菌孢子的热死灭动力学符合一级反应动力学规律 热阻(对热抵抗力):微生物在某一特定条件的死亡时间。 相对热阻:指在相同条件下两种微生物热阻的比值 芽孢的热阻特别高的原因: 1)芽孢具有吡啶二羧酸,能增强对热抵抗力 2)芽孢厚而且结构致密,热不易透过 3)芽孢的游离水分少,蛋白质含水量较营养细胞蛋白质含水量低。 K(比热死亡速率常数)由两个因素均定 1、微生物的种类 2、灭菌温度,是热力学温度T的函数。(核心问题) 从阿累尼乌斯方程可以得出以下结论: 1)活化能E的大小对K值有重大影响,其他条件 相同时E愈高,K值愈低,热死速率愈慢。 2)不同菌的孢子热死反应的E可能各不相同,在 相同T灭菌,尚不能肯定E低的孢子的死亡速度一 定比E高的快,因为K并不是唯一决定于E。 3)对方程两边取对数得: lnK= - E/RT + lnA 在不同的温度T下做灭菌实验,求得相应的K值,按lnK----1/T作图,从直线的斜率可以求出E。 4)K是E和T的函数,K对T的变化率与E有关。 反应的活化能E愈高,温度T的变化对K的影响愈大 对上式两边求导数得:dlnK/dT=△E/(RT2) 试验证明,细菌孢子热死灭反应的△E很高,而待灭菌培养基中某些有效成分热破灭反应的△E较低。 将T迅速提高到较高的灭菌温度,可以加快细菌孢子的死灭速度 高温短时间灭菌既能快速的灭菌,又能有效的保存培养基中的有效成分,这是灭菌动力学所得出的重要结论。 培养基的分批灭菌 将配制好的培养基输入发酵罐中,用蒸汽加热,使培养基和设备同时灭菌的一种灭菌方式,又称实罐灭菌。 ? 灭菌过程 过程包括升温、保温和冷却等三个阶段 各阶段对灭菌的贡献:20%、75%、5%。 培养基的升温可由两种方式实现:间接加热,在夹套或蛇管中通入蒸汽加热;直接加热,在培养基中直接通入热蒸汽加热。 除了这种积分方式以外,工程上还常用图解积分法,即从设计的T-t数据换算成K-t数据,进行图解积分。 将配制好的并经预热(60~75℃)的培养基用泵连续输入由直接蒸汽加热的加热塔,使在短时间内达到灭菌温度(126~132℃)。 然后进入维持罐(或维持管),使在灭菌温度下维持3~7分钟后再进入冷却管,使其冷却至接种温度并直接进入已事先灭菌(空罐灭菌)过的发酵罐内。其温度一般以126~132 ℃为宜,总蒸汽压力要求达到0.044~0.049 MPa以上。 第二节??? 连续灭菌 二、连续灭菌反应器的流体流动模型 返混现象 : 反应器中停留时间不同的物料之间的混合称为返混。 按照返混的程度,在化学工程中建立了两种理想的连续流动反应器模型。 连续搅拌罐(CSTR)和活塞流反应器(PFR)反应器 第二节??? 连续灭菌(1)PFR模型(活塞流模型)plug flow reactor QdN=-KNAdl ∵ 第二节??? 连续灭菌(2)CSTR模型(全混流模型)Continued flow Stirred Tank Reactor QN0=N(Q+K·V) 第二节??? 连续灭菌(3)多级全混流釜模型Multiple CSTRs in series 在工程实践中常将几个CSTR反应器串联使用,来接近PFR的效果。 Multiple CSTRs in series 分批灭菌与连续灭菌的比较
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