第二节氨基酸要点分析.pptVIP

第二节 蛋白质基本结构单位 —氨基酸 ? 分类 I. 根据R基化学结构分类： — 一氨基一羧基氨基酸 （二）不常见的蛋白质氨基酸 6-N甲基赖氨酸 (三)非蛋白质氨基酸举例 （瓜氨酸） 三、氨基酸的一般物理性质 都为白色晶体，不同氨基酸结晶形状不同。 熔点很高，一般在200℃以上。 溶解度：大多数氨基酸都溶于水。Pro溶解度最大，其次为lys, Arg。Tyr的溶解度较小。 四、氨基酸的旋光性和光吸收 1. 光学异构体和旋光性 -给定氨基酸的两个光学异构体使偏振面旋转方向相反，但旋转程度相等。（甘氨酸除外） 20种氨基酸在可见光区都没有光吸收，但在远紫外区(220nm)均有光吸收。 ? 氨基酸在晶体和水中主要以兼性离子存在。 （一）氨基酸的两性解离 2.氨基酸的解离曲线 Fig. 1-5 The titration curve of glycine ? Handerson-Hasselbalch公式 （二）氨基酸的等电点（isoelectric point, pI） 定义： 主要指?-NH2和? -COOH及侧链R基上功能团所参与的反应。 2. 烃基化反应 （三） ?-氨基、α-羧基共同参加的反应 1.与茚三酮反应 2. 成肽反应 （四）侧链R基参加的反应 氨基酸R基上的功能团也能发生化学反应。 侧链R基参加的反应举例: R基可解离的基团的 解离常数用KR 表示。 （2）酸性氨基酸的解离曲线 pK1=2.19 pKR= 4.25 pK2= 9.67 Fig. 1-6 The titration curve of Glutamate 返回 pK1=1.82 pKR= 6.0 pK2=9.17 His 在pH7处有显著的缓冲能力 （2）碱性氨基酸的解离曲线 Fig. 1-7 The titration curve of Histidine 返回 调节溶液pH值，使氨基酸处于兼性离子状态，此时氨基酸所带正负电荷数相等，即净电荷为0，在电场中既不向阳极又不向阴极移动，这时溶液的pH值即为氨基酸的等电点。 There is a specific pH (designated pI) at which an amino acid has equal positive and negative charge, the net electric charge is zero. An amino acid does not move in an electric field at its pI, called isoelectric point. pH=pI pH pI pH pI 在电场中 移向负极 不移动 移向正极 静电荷 + 0 - ? 在一定pH范围内，pH离pI 越远，氨基酸所带静电荷越大； 小结 pH=pI, 氨基酸为兼性离子，不带电； pH＞pI, 氨基酸为阴离子，带负电； pH＜pI, 氨基酸为阳离子，带正电； 利用各种aa的pI不同，可通过电泳法、离子交换层析法进行分离。 ? 根据 pK 值计算pI: 中性氨基酸的等电点 pI = (pK1+pK2)/2 酸性氨基酸的等电点 pI = (pK1+pKR)/2 碱性氨基酸的等电点 pI = (pK2+pKR)/2 pI为兼性离子两侧相应解离基团pK 的算数平均值。 （一） ? -NH2参加的反应 六、氨基酸的化学反应 ?-氨基可与HNO2、酰化试剂反应，还可发生烃基化、形成西佛碱、脱氨基反应。 1. 与HNO2反应 此反应可以用于氨基酸定量和蛋白质水解程度的测定，是Van Slyke测定氨基氮的基础。 N H 2 R - C H - C O O H + H N O 2 O H R - C H - C O O H + N 2 + H 2 O ? ? 与2，4-二硝基氟苯（DNFB 或 FDNB） 的反应 弱碱中 DNP-氨基酸（黄色） Sanger 试剂 此反应是Sanger法鉴定多肽或蛋白质N末端氨基酸的依据。 与苯异硫氰酸酯（PITC）反应 此反应是Edman法鉴定多肽或蛋白质N末端氨基酸的依据，在aa 序列分析方面占有重要地位。 苯乙内酰硫脲- 氨基酸（PTH-aa） PTC - aa （二）?-羧基参加的反应 氨基酸的?-羧基可以成盐、成酯、成酰氯、成酰胺、脱羧和叠氮化。 干燥HC