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内容简介 基因工程,是生命科学的核心学科之一。它以类似于工程学的方法与技术,对生命元件进行设计、构建、组装和应用,有目的地改造生物物种生产出人们所期望的生命物质。 基因工程技术的显著特点是,打破了常规育种难以突破的物种界限,使原核、真核生物之间,动植物之间,以至人与其他生物之间的遗传信息进行重组和转移。 本课程主要介绍基因工程概述、基因工程操作原理(从基因的表达调控机制入手,将DNA重组技术归纳为切、接、转、增、检五大基本操作单元)、基因工程应用(按照受体细胞的生物学分类,逐一展开各系统基因工程的原理和应用)。 基因工程的地位 第一章 基因工程概述 主要教学内容 1.1 基因工程与基因操作的基本概念 1.2 基因工程的诞生与发展 1.3 基因工程的研究内容 1.4 基因操作的理论基础 1.5基因工程的应用 1.6 基因工程的安全性 教学要求 与传统育种相比,基因工程育种有哪些特点和优势? 简述基因工程的主要步骤。 基因工程技术存在哪些潜在危害? 简述基因的结构组成对基因操作的影响。 1.1 基因工程的基本概念 1.1.1 重组DNA技术的基本定义 重组DNA技术是将一种生物体(供体)的基因与载体在体外进行拼接重组,然后转入另一种生物体(受体)内,使之按照人们的意愿稳定遗传,并表达出新产物或新性状的DNA体外操作程序,也称为分子克隆技术。 因此,供体、受体、载体是重组DNA技术的三大基本元件。 真核细胞基因结构和原核细胞基因结构的异同点 1)相同点: 都是由能够编码蛋白质的编码区和具有调控作用的非编码区组成。 2)不同点: 原核细胞基因的编码区是连续的,真核细胞基因的编码区是间隔的,不连续的。 在真核细胞中,控制不同种类的蛋白质的基因,所含的外显子和内含子的数目是不同的,长度也有差别。 注:内含子:指真核生物基因中不能翻译成蛋白质的DNA片段; 外显子:能够翻译成蛋白质的任一间断的基因片段,一个基因可有多个外显子。 基因工程试剂的高回报 碱性成纤维细胞生长因子 231元/ug 红细胞生成素 1072元/ug 白细胞介素-2 410元/ug 巨细胞粒细胞集落刺激因子 1960元/ug 胰岛素 10.2元/mg 本章应掌握的内容 基因工程的概念及特点。 基因工程理论理论上的三大发现和技术上的三大发明。 基因工程的主要步骤。 基因工程技术的潜在危害性。 1 ) 检测水污染 用重组细菌或转基因鱼等检测水污染。 2 ) 生物降解 用带有重组质粒的“超级菌”分解油(烷烃类)、有机农药污染。 1.5.4 基因工程在环境保护中的应用 生产interferon ?1? 1990 生产组织纤溶酶原激活剂(TPA) 1987 第一个自己生产的产品(人生长激素) 1985 第一个基因重组药(人胰岛素)上市 1982 公司上市,募集$ 35million 1980 克隆了人生长激素基因 1979 克隆了人胰岛素基因 1978 首次在微生物中生产了人蛋白生长激素抑制素 1977 Genentech Genentech创立 1976 Genentech的骄人业绩 pSC101 抗四环素 pR6-5 抗卡那霉素 DNA连接酶 重组DNA分子 EcoRI 抗卡那霉素基因 培养平皿 卡那霉素基因 四环素\卡那霉素基因 大肠杆菌 四环素平板 抗四环素 抗卡那霉素 抗四环素\抗卡那霉素 (1)目的基因的获取 从复杂的生物基因组中,经过酶切消化或PCR扩增等步骤,分离出带有目的基因的DNA片断。 (2)重组体的制备 将目的基因的DNA片断插入到能自我复制并带有选择性标记(抗菌素抗性)的载体分子上。 1.3 基因工程的研究内容(步骤) 将重组体(载体)转入适当的受体细胞中。 (4)克隆鉴定 挑选转化成功的细胞克隆(含目的基因)。 (5)目的基因表达 使导入寄主细胞的目的基因表达出我们所需要的基因产物。 (3)重组体的转化 基因工程基本过程 1.4 基因的结构-基因操作的理论基础 基因是遗传信息的基本单位。 基因是一段核苷酸序列;可以是连续的,也可以是不连续的;可以是DNA也可以是RNA;可以存在于染色体上,也可以存在于染色体之外(如质粒等)。基因具有可分性、重叠性和可变性。 什么是基因? 1.基因是存在于细胞内有自我繁殖能力的遗传单位. 2.基因是一个具有遗传功能的特定核苷酸序列的DNA片段. 3.编码一个RNA或一条多肽链的DNA片段称为一个基因. 4.基因是生物体遗传的基本单位,存在于细胞的染色体上,作直
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