基因工程的操作程序资料.pptVIP

* * 三、习题反馈 1．下图为DNA分子在不同酶的作用下所发生的变化，图中依次表示限制性核酸内切酶、DNA聚合酶、DNA连接酶、解旋酶作用的正确顺序是 (　　) 　　　　　　　　　　　　　　　　　　 A．①②③④ B．①②④③ C．①④②③ D．①④③② C 2．下图表示一项重要的生物技术，对图中物质a、b、c、d的描述，正确的是 A．a的基本骨架是磷酸和核糖交替连接而成的结构 B．要获得相同的黏性末端，可以用不同种b切割a和d C．c连接双链间的A和T，使黏性末端处碱基互补配对 D．若要获得原核生物的d，则一般采用人工合成方法 B 3.(2010年高考天津理综)下图是培育表达人乳铁蛋白的乳腺生物反应器的技术路线。图中tetR表示四环素抗性基因，ampR表示氨苄青霉素抗性基因，BamHⅠ、HindⅢ、SmaⅠ直线所示为三种限制酶的酶切位点。 (1)图中将人乳铁蛋白基因插入载体，需用____________限制酶同时酶切载体和人乳铁蛋白基因。筛选含有重组载体的大肠杆菌首先需要在含______________的培养基上进行。 Hind Ⅲ和BamH Ⅰ 氨苄青霉素 3.(2010年高考天津理综)下图是培育表达人乳铁蛋白的乳腺生物反应器的技术路线。图中tetR表示四环素抗性基因，ampR表示氨苄青霉素抗性基因，BamHⅠ、HindⅢ、SmaⅠ直线所示为三种限制酶的酶切位点。 (2)能使人乳铁蛋白基因在乳腺细胞中特异性表达的调控序列是________(填字母代号)。 A．启动子　　B．tetR　　C．复制原点　　D．ampR A 3.(2010年高考天津理综)下图是培育表达人乳铁蛋白的乳腺生物反应器的技术路线。图中tetR表示四环素抗性基因，ampR表示氨苄青霉素抗性基因，BamHⅠ、HindⅢ、SmaⅠ直线所示为三种限制酶的酶切位点。 (3)过程①可采用的操作方法是________(填字母代号)。 A．农杆菌转化　　　　　　B．大肠杆菌转化 C．显微注射 D．细胞融合 c 3.(2010年高考天津理综)下图是培育表达人乳铁蛋白的乳腺生物反应器的技术路线。图中tetR表示四环素抗性基因，ampR表示氨苄青霉素抗性基因，BamHⅠ、HindⅢ、SmaⅠ直线所示为三种限制酶的酶切位点。 (4)为检测人乳铁蛋白是否成功表达，可采用________技术。 A．核酸分子杂交 B．基因序列分析 C．抗原—抗体杂交 D．PCR c 4、知识框架（概念图） 目的基因插入细胞质、插入细胞核问题 黏性末端的确定问题 切口问题 基因治疗 1、如果用同一种限制酶切割目的基因和质粒，再用DNA连接酶连接会有怎样的连接情况？ 2、如果用双酶切目的基因和质粒会怎样？ ??????????????????  图为某种质粒表达载体简图，小箭头所指分别为限制性内切酶EcoRⅠ、BamHⅠ的酶切位点，ampR为青霉素抗性基因，tctR为四环素抗性基因，P为启动子，T为终止子，ori为复制原点。已知目的基因的两端分别有包括EcoRⅠ、BamHⅠ在内的多种的酶切位点。 （1）将含有目的基因的DNA与质粒表达载体分别用EcoRⅠ酶切，酶切产物用DNA连接酶进行连接后，其中由两个DNA片段之间连接形成的产物有? ?? ?? ? ? ? 、? ?? ?? ? 、? ?? ?? ?? ?? ? ? ? 三种。若要从这些连接产物中分离出重组质粒，需要对这些连接产物进行分离纯化 。 目的基因与载体连接物 目的基因自连物 载体自连物 （2）用上述3种连接产物与无任何抗药性的原核宿主细胞进行转化实验。之后将这些宿主细胞接种到含四环素的培养基中，能生长的原核宿主细胞所含有的连接产物是? ?? ?? ? ；若接种到含青霉素的培养基中，能生长的原核宿主细胞所含有的连接产物是? ?? ?? ??? 。 载体自连物 目的基因与载体连接物、载体自连物 （3）目的基因表达时，RNA聚合酶识别和结合的位点是? ?? ? ，其合成的产物是? ?? ? 。（4）在上述实验中，为了防止目的基因和质粒表达载体在酶切后产生的末端发生任意连接，酶切时应选用的酶是? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ? 。 启动子 mRNA EcoRⅠ、BamHⅠ 为扩大可耕地面积，增加粮食产量．黄河三角