番茄红素提取工艺(终稿)资料.ppt

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番茄红素提取工艺研究 指导老师:万红贵 生工0701 章训 第一章 文献综述 1.1 番茄红素的性质 性质:番茄红素分子式为C40H60。不溶于水,难溶于甲醇、乙醇,可溶于乙醚、石油醚、正己烷等有机溶剂。其稳定性较差,长时间加热或紫外照射,容易发生顺反异构和氧化降解。 1.2 番茄红素功能 抗癌,保护心血管 ,抗衰老 1.3 常见提取方法 有机溶剂提取法:正己烷、丙酮、石油醚、乙酸乙酯等 超临界CO2萃取法 超声波法:超声波的空化和振动作用 微波提取法:穿透萃取介质激化细胞内的极性分子 酶法提取法:酶反应破壁提取 提取方法 优点 缺点 备注 有机溶剂提取法 工艺及设备简单 成本低 有机溶剂残留 提取率不高 已实现工业化 超临界CO2提取法 条件温和、无溶剂残留、提取时间短、提取率高 成本很高 尚未工业化 场强化有机溶剂萃取(包括超声波萃取和微波萃取) 能耗低 溶剂用量少 提取率高 技术不稳定 无法规模化 仅限于实验室研究 酶法提取法 低能、缩短工时、温和、环保、提取率高 尚在研究阶段 尚未工业化 1.4 各种提取方法比较 1.5 番茄红素的前景 国内的产量年增长率约为15% 世界消耗量年增长率约为10% 6%:1300元/kg 10%:2500元/kg 15%:4000元/kg 1.6 本课题研究内容 对三孢布拉霉发酵液进行预处理,得到三孢布拉霉湿菌丝体 结合球磨法 ,确定最佳提取溶剂 确定复合酶种类以及酶用量前提下,在提取温度、提取时间比、提取pH三方面进行单因素实验,并进行正交实验优化出最佳提取工艺 第二章 实验材料与方法 2.1 原料 三孢布拉霉菌丝体 南京工业大学国家生化工程技术研究中心发酵代谢工程实验室。 2.2 实验方法 工艺流程: 分析方法: 番茄红素含量测定 :HPLC法测定 三孢布拉霉湿菌丝体含水量计算 提取率计算 实验内容: 提取有机溶剂选择:正己烷、乙酸乙酯、丙酮、石油醚 发酵液预处理:碱液、酒精、碱液+酒精混合处理 复合酶破壁提取优化:酶添加量、酶解温度、酶解pH、酶解时间比 第三章 结果与分析 3.1 提取有机试剂选择 分类 一号无水乙醇 二号丙酮 三号石油醚 四号正己烷 五号乙酸乙酯 提取率(%) 17.4 28.7 25.6 31.9 27.1 正己烷提取效果最 好,达到31.9% 3.2 发酵液预处理 碱液处理 弱碱Na2CO3 处理效果最好, 提取率40.3% 乙醇处理 质量体积比为1:2时 提取效果最好,达 到39.5% 不同处理方法的比较 混合溶液处理后 提取率达到46.2% 3.3 复合酶破壁提取优化 酶添加量 酶添加量0.06g 以后,随着量增 加,提取效果 提高不明显 蛋白酶:65.1% 纤维素酶:46.6% 酶解pH pH6.0时,提取率达到最高 77.6%和57.3% 酶解温度 45℃时提取率最 高,分别为78.9% 61.5% 酶破壁时间比 蛋白酶破壁4h后纤维素 酶破壁2h,提取率达到 90.2% 酶破壁提取正交实验 水平 因素 A 酶解PH B 酶解温度(℃) C 酶解时间比(h/h) 1 5.0 40 4:2 2 6.0 45 3:3 3 7.0 50 2:4 编号 A(pH) B(温度) C(时间) 提取率1 提取率2 平均值 1 1 1 1 77.3 76.3 76.8 2 1 2 2 81.5 83.1 82.3 3 1 3 3 79.2 79.6 79.4 4 2 1 2 82.5 83.9 83.2 5 2 2 3 87.0 87.6 87.3 6 2 3 1 78.0 80.2 79.1 7 3 1 3 76.3 76.1 76.2 8 3 2 1 81.3 77.9 79.6 9 3 3 2 74.2 75.0 74.6 K1 238.5 236.2 235.5 K2 249.6 249.2 240.1 K3 230.4 233.1 242.9 k1 79.5 78.7 78.5 k2 83.2 83.1 80.0 k3 76.8 77.7 81.0 R 6.4 5.4 2.5 影响顺序为: ABC最佳组合 为A2B2C3,即 pH6.0、45℃、 破壁时间比2:4 提取率87.3%,没 pH6.0、45℃、 破壁时间比4:2 提取率90.2%高 第四章 结论与展望 4.1 结论 酶法破壁提取番茄红素,具有反应条件温和、能耗低、环保、绿色等优点,更适用于工业化生产。 通过单因素实验和正交实验,得到最佳酶解工艺为:酶添加量0.3%,酶解pH6.0,45℃恒温水中蛋白酶酶解4h,

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