基因工程细胞工程胚胎工程复习课件资料.pptVIP

基因工程、细胞工程、胚胎工程 专题复习 专题一 基因工程 1、基因工程的基本操作程序 目的基因的获取 基因表达载体的构建 将目的基因导入受体细胞 目的基因的检测和鉴定 （核心） （三个方法） （三种受体） （三个步骤P14） 2、目的基因获取方法 从基因文库中获取 利用PCR技术扩增目的基因 人工合成目的基因 3、基因工程用到的工具酶 限制酶和DNA连接酶 E·coliDNA连接酶 T4DNA连接酶 5、基因表达载体的组成 启动子、终止子、目的基因和标记基因 4、基因工程用到的运载体 质粒（最常用）、λ噬菌体的衍生物和动植物病毒 6、导入受体细胞的方法 (1)植物细胞 双子叶植物 单子叶植物 农杆菌转化法 基因枪法 (2)动物细胞 显微注射法 受体细胞常用： 受精卵 (3)微生物细胞 用Ca2+处理细胞，成为感受态细胞。 基因工程 细胞工程 （核移植技术） 7、成功表达的结果： 转基因小牛合成人的血清白蛋白。 专题二 细胞工程 一、植物细胞工程 1、去壁： 酶解法（纤维素酶和果胶酶） 2、原生质体融合： 物理法：电激、振动、离心 化学法：聚乙二醇 3、融合完成的标志： 产生新的细胞壁 4、理论基础： 细胞膜的流动性 植物细胞的全能性 5、意义： 克服不同物种间的远缘杂交不亲和障碍。 植物组织培养技术 脱分化 再分化 若生产人工种子，则培养到 阶段； 若提取细胞产品（如紫草素），则一般培养到 阶段； 如培育新个体，则应该培养到 阶段。 6、关于植物组织培养技术： 植物组织培养的目的不同，培养阶段也就不同： 胚状体 愈伤组织 试管苗 下图为植物体细胞杂交过程示意图。下列说法不正确的是（ ） A. 植物体细胞杂交的最大优点是可以克服远缘杂交不亲和的障碍 B. 杂种细胞经过④和⑤过程可以培育成杂种植株说明杂种细胞具有全能性 C. 尽管愈伤组织可以进行光合作用，但其培养基中仍需要糖类、氨基酸等有机营养 D. 若A的基因型为Rr，B的基因型为Yy，则最终形成的杂种植株的基因型为RrYy C 二、动物细胞工程 技术手段 动物细胞培养 动物细胞融合 动物细胞核移植 生产单克隆抗体 （基础） 动物细胞培养 1、取材： 3、组织处理： 4、原代培养、传代培养、 接触抑制 剪碎 胰蛋白酶或胶原蛋白酶 幼龄的动物组织 5、培养条件 无菌无毒、动物血清、CO2 2、理论基础： 细胞增殖 动物体细胞核移植技术 1、取材： 卵母细胞 原因： 卵母细胞体积大，易于操作； 含有促使细胞核全能性表达的物质. 2、去核方法： 显微操作去核法 动物体细胞核移植技术 3、理论基础： 动物细胞核的全能性 4、生殖方式： 无性生殖 5、用核移植得到的动物成为克隆动物。 1、该过程中使用到了哪些生物技术手段？ 2、通过该过程可得出什么结论？ 3、克隆羊的性别与哪只羊相同？为什么？ 4、克隆羊的性状主要与哪只羊相同？ 5、在操作过程中为什么要用去核的卵细胞做受体细胞？ 6、克隆羊的繁殖过程应属于哪种方式? 转基因克隆动物 动物细胞融合技术（制备单克隆抗体） 1、诱导方法： 物理方法 化学方法 生物方法: 与植物同 灭活的病毒 注射抗原 B淋巴细胞 2、理论基础： 细胞膜的流动性、细胞增殖 3、两次筛选的目的 第一次： 筛选出杂交瘤细胞 第二次： 筛选出能产生特异性抗体的杂交瘤细胞 4、杂交瘤细胞的特点 既能无限繁殖，又能产生特异性抗体。 5、的特点 特异性强、灵敏度高，能大量生产（制备）。 比较 项目 植物细胞工程 动物细胞工程 原理 ①植物组织培养──细胞全能性 ? ②植物体细胞杂交──细胞的全能性、细胞膜流动性 ①动物细胞培养──细胞增殖 ? ②体细胞核移植──动物细胞核的全能性 ? ③单克隆抗体的制备──细胞膜的流动性、细胞增殖 ? ④动物细胞融合──细胞膜流动性 工具酶 纤维素酶、果胶酶 胰蛋白酶、胶原蛋白酶 动、植物细胞工程技术手段的原理和工具酶 如图表示单克隆抗体的制备过程，请回答下列?问题： （1）细胞A具有产生????????? 的功能。细胞B的突出特点是???? ????? 。诱导细胞A和B融合的诱导剂通常是　　　　　或聚乙二醇。 ?（2）若细胞A的基因型为AA，细胞B的基因型为BB，生产的目标应该是基因型为　　　　　的细胞。 可通过特定的　　　　　培养基将所需的融合细胞筛选出来。 特异性抗体　 能够无限增殖 灭活的病毒 AABB 选择 （3）动物细胞培养液的配方通常含有葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素等，与植物细胞培养基有所不同的是，还含有　　　　　。细胞培养应在含5％CO2的恒温培养箱中进行，CO2的作用是