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39李国丽红掌组培快繁研究.doc8.doc
兰州交通大学化学与生物工程学院
综合能力训练Ⅰ——文献综述
题目:红掌的组培快繁技术研究进展
作者:李国丽
学号:201107239
指导教师:谢放
完成日期:2013-7-21
红掌组培快繁技术的研究进展
兰州交通大学化学与生物工程学院生物工程2011级
摘要:本文介绍了红掌组培快繁方面的研究进展,外植体的消毒培养基、炼苗移栽生根壮苗等进行了综述,同时还指出了红掌组培快繁的研究意义、市场前景及种苗繁殖方面存在的问题
关键词:红掌 ;组培快繁 ;培养基 ;激素
1. 引言
红掌天南星科花烛属,原产地热带雨林,因、花形独特、瓶插寿命长、周年开花的特性已成为一种代表时尚和潮流的鲜花,在国外被视为与洋兰一样的高级花材并且是一种很有发展前景的室内装饰绿化植物,深受消费者青睐,在全球热带花卉贸易中,销售量仅次于兰花,名列第二。
分株繁殖。红掌植株基部长出吸芽,产生根系后可分株,每年可分3~4株,繁殖系数较低,很难满足规模化生产所需的种苗现在主要通过组织培养进行种苗的快速繁殖,这样可以在较短的时间内生产整齐一致的优质种苗,供应生产的需要。采用组织培养快繁技术是大量、快速、整齐一致繁殖红掌种苗的一条有效途径。Pierik对红掌的组织培养获得成功以后,国内外学者对红掌组织培养进行了大量的研究,但绝大多数的研究报道只是仅限于某一个单一的品种或某一个单一器官的培养。而在1986年Keller用MS.skoog培养基作叶插培养研究,12个月后形成了愈伤组织。在1990年,Lightboarn0.5mg/L的2,4-D对愈伤组织进行诱导,发现其诱导效果最好,然后又加大NH4NO3浓度发现可以使叶片愈伤组织的增殖速度加快。在1992年,Kuehrle4种杂交幼苗的叶进行了组培,1个月后出现了半透明的胚胎。在2~3个月后,MS+6—BA 0.2mg/L+2%蔗糖进行继代培养发现,它的成苗在移入温室后的成活率比较高。复旦大学在1994年研究发现,幼苗微培养中昼长夜短也可以诱导愈伤组织的生长;研究也表明3%葡萄糖对愈伤组织形成是最有效的。我国从1998年开始研究,现在已经成功掌握了植株体系的建立,继代增殖培养,,,HgCl2两步消毒的方法发现其消毒效果较好;如果出现内生菌污染时,可以在培养基中添加抗生素来处理,比如在继代培养的固体培养基上可以适当添加硫酸阿米卡星(5~20mg/L),可以显著降低其污染率,而且对红掌试管苗的生长影响比较小,也可以使受到污染的试管苗得以再次利用。但是我们知道造成污染的原因不止一种,所以在实际生产中还应该具体问题具体分析,从不同方面预防和解决。赵冠武[6]等人研究得出红掌外植体组织培养的最佳消毒方法是将选择外植体用自来水冲洗30分钟稍晾干,在无菌条件下,用75%酒精浸泡15秒作表面消毒处理,再用0.1%升汞消毒分钟,其中叶片消毒时间5~7min、茎段l5~20min,叶柄10~12min消毒过程可轻轻摇动,用无菌滤纸吸干,用无菌水冲洗次,每次2~3min,最后用无菌滤纸吸干水分。保留茎段约1cm、叶柄2~3cm、叶片4mm×4mm进行培养1cm长叶柄,剪取茎段,无菌条件下采用75%酒精和0.1%的升汞进行表面消毒,用无菌水冲洗了5次,剪取留有约0.5cm长叶柄的茎段接种于初代培养基上,40天后调查红掌茎段培养的污染率是比较低的。丁爱萍[7]等人发现75%乙醇处理30s 0.2%HgCl2处理6min后,再用0.1%HgCl2处理7min后发现污染率最低为75%。郭水良[8]等人对灭菌时间也做了研究发现当灭菌时间为八分钟时消毒效果是最合理的。
2.2培养基成分及影响
组织培养就是通过添加外源营养成分和激素等条件来调控外植体细胞的增生,从而诱导其萌发,从而产生优质整齐的丛生苗,然而组培的目的是否实现,主要是由培养基成分和添加激素的种类和浓度所决定的。大多数研究人员认为红掌愈伤组织诱导最适宜的培养基是改良MS或l/2MS培养基,这可能是由于红掌愈伤组织在诱导过程对某种大量元素需求较低的原因导致的。蔡维藩[12]认为NH4N03对愈伤组织的诱导有较大影响,但对增殖和芽的产生没有明显的影响。兰芹英[18]等人用叶片和叶柄在不同氨盐量培养基上B5 (NH4)2S04 135mg/L MS(NH4N031680mg/L)和1/2Ms(NH4N03840mg/L)中的反应,发现1/2MS上愈伤组织的诱导率最高,这与Pier血和Kuni的研究结果是相似的,较低浓度的氨盐对红掌愈伤组织的诱导是有利的,205—825mg/L较为合适,大于825mg/L或小于205mg/L都不利于愈伤组织的诱导。夏时云[14]等人研究发现MS中比较高的NH4N03容易引起叶片褐化,导致诱导率降低,但是如果将MS中NH4N03的量降低到1/8或者l/4就会获得不错的结果。
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