VEGFR1-positivehaematopoieticbonemarrowprogenitorsinitiatethepre-metastaticniche中文翻译.docVIP

VEGRR1 阳性的骨髓造血祖细胞形成转移前壁龛（微生态） 摘要：肿瘤细胞向某一确定的目标位置转移的细胞及分子机制很不清楚。本课题证明，在肿瘤细胞转移之前，骨髓来源的、表达VEGFR1（血管内皮生长因子受体1，亦被称为 Flt1）的造血祖细胞已经来到肿瘤特定的转移前位置，并形成细胞集群。通过抗体或者将VEGFR1+细胞从野生小鼠骨髓中去除而抑制VEFR1功能，可以防止转移前细胞集群的形成及肿瘤的转移；反之，在Id3（分化抑制剂3）敲除的小鼠体内重建具有Id3功能的VEGFR+细胞，可以建立细胞集群并形成肿瘤转移。我们也发现，VEDFR+细胞表达VLA-4（一种整合蛋白 a4b1），而转移处的纤维母细胞中则有VLA-4的配基----一种上调肿瘤特异生长因子的纤连蛋白；它们共同提供了允许肿瘤细胞到来的环境。该环境根据具有独特转移传播模式的不同肿瘤类型而重新调整纤连蛋白的表达以及细胞集群的形成，从而改变转移的表现。这些发现证明，VEGFR1+造血祖细胞对转移调节过程是必不可少的；同时提示，纤连蛋白及VEGFR1+、VLA-4+集群的类型决定肿瘤扩散的器官特异性。 (PKH26-Gl)患癌小鼠的VEGFR1+细胞。经过一个小时在试管内与绿色荧光标记(PKH2-GL)的B16或者LLC细胞共孵化，发现HPCs聚集、增殖（150%）并促进了肿瘤细胞的粘附和增殖。相反，如果之前将VEGFR1+HPCs与抗VEGFR1抗体或抗VLA-4抗体共培养，则会阻断这种密切关系及扩增。运用细胞体外迁移能力分析技术，发现肿瘤细胞在VEGFR1+显示出比在VEGFR1-及单纯培养中更强的运动能力。SDF-1/CXCR4趋化因子轴决定了HPCs的归巢或者在骨髓中的居留。表达CXCR4的特殊的肿瘤类型可能也可根据局部的趋化因子浓度进行迁移，在完全成型的具有VEGFR1+细胞的转移前集群中，成纤维细胞及纤连蛋白、SDF-1（CXCL12）均开始高表达；同时也观察到CXCR4在B16和LLC肿瘤中的表达。这些数据表明SDF-1可为吸引CXCR4+的肿瘤细胞来到转移前壁龛提供一个通路。 肿瘤调控媒介决定转移类型（MCM：B16-melanoma-conditioned media LCM： LLC-conditioned media） 为了描述出肿瘤器官特异性转移潜能的大致机制，我们应用了肿瘤调节媒介的模型，即MCM和LCM。将LMC腹腔注射后，与原发LLC相似，但更快地形成了可能来自于固有成纤维细胞的纤连蛋白表达，以及更快的BMDCs集群的形成；而MCM比LCM导致了更大范围器官（如肠道）（与空白对照相比）内成纤维细胞的增殖和伴随着集群性的的纤连蛋白的表达。基于LLC和B16在转移潜能及表现上显著的差别，我们分析了LCM及MCM在生长因子上的不同。两种调控媒介均含有较高水平的VEGF，较患癌小鼠的血清中为多。在MCM和来源于B16的小鼠血浆中我们发现更高水平的特异的PIGF（胎盘生长因子）；PIGF仅通过VEGFR1进行信号转导，这不同于LCM和LLC来源的血浆。此外还发现LLC的低转移变种来源血浆中的VEGF及PIGF较其调节媒介（L-LCM）中及高转移变种来源血浆中为低。细胞体外迁移能力分析发现发现LCM及MCM极大增强了VEGFR1+的BMDCs的迁移能力。那么MCM中的PIGF这样的细胞因子能否引导LLC转移至其不常见的转移部位。在LLC皮下种植前，我们先用MCM处理小鼠，伺候每天观察，结果发现了LLC转移的重新定位：从肺至肾、脾、肠、输卵管等，这都是恶黑常见的转移部位。以上结果表明，与VEGFR1+细胞集群相同，肿瘤特异的、存在于其调控媒介中的趋化因子和/或细胞因子，也是决定肿瘤转移扩散多样性的一个因素。 特性肿瘤转移对某些器官具有偏好，而肿瘤向某一已确定的部位转移的具体分子及细胞机制仍不明确。目前的说法认为转移偏好反映了肿瘤细胞自身的分子差异及周围基质细胞的潜在影响，如埋管系统、结缔组织及免疫细胞。我们的实验则引荐一种新的概念：肿瘤转移源自基于像分子书签一样特异定位的VEGFR1+细胞向靶器官迁徙、形成接纳转移的壁龛等一系列已定义好的事件。数据表明，器官特异的远处转移扩散是由肿瘤分泌的激素差异导致的。肿瘤接种几天内，原发肿瘤常见转移靶器官中即发现成纤维细胞或成纤维细胞样细胞增殖、纤连蛋白表达上调。同时HPCs从骨髓中游出进入外周循环，纤连蛋白则放出龛特异的方向趋化线索，在CXCR4+的肿瘤细胞及VEGFR2+的上皮细胞到达之前，引导表达VLA-4和Id3的VEGFR1+HPCs穿过内皮到达要形成转移前壁龛的局部。转移壁龛集群进而表达MMP9改变为环境，增强SDF-1的表达，形成趋化因子梯度，吸引肿瘤细胞及其相关组分来到局部，从而形成一个完整的转移灶。