氨基酸的发酵资料.ppt

二、 葡 萄 糖 合 成 谷 氨 酸 的 代 谢 途 径 三、生物合成途径 葡萄糖经糖酵解（EMP途径）和己糖磷酸支路（HMP途径）生成丙酮酸，再氧化成乙酰辅酶A（乙酰CoA），然后进入三羧酸循环，再通过乙醛酸循环、CO2固定作用，生成α-酮戊二酸，α-酮戊二酸在谷氨酸脱氢酶的催化及有NH4＋存在的条件下，生成谷氨酸。 四、谷氨酸生物合成的调节机制 1、糖代谢的调节 生物素对糖代谢的调节： （1）对 EMP 和 HMP 途径比例的影响 （2）对糖代谢速度的影响 （3）对乙醛酸循环的影响 2、氮代谢的调节 控制谷氨酸发酵的关键之一就是降低蛋白质的合成能力，使合成的谷氨酸不转化成其他的氨基酸和参与蛋白质的合成。 生物素亚适量时，几乎没有异柠檬酸裂解酶，又由于α-酮戊二酸脱氢酶的缺失，TCA循环被阻断，使ATP大量减少，导致蛋白质的合成停滞，在NH4＋适量时，合成谷氨酸并积累。 3、细胞膜透性的调节 （1）控制磷脂的合成 导致形成磷脂合成不足的不完全细胞膜。方法有4种： ①选育生物素缺陷型菌株，限制培养基中生 物素的浓度； ②选育油酸缺陷型菌株，限制培养基中油酸的 浓度； ③选育甘油缺陷型菌株，限制培养基中甘油的 浓度； ④添加表面活性剂（如吐温60）或高级饱和脂 肪酸（C16-18）。 （2）控制细胞壁的合成 导致形成不完全的细胞壁进而导致形成不完全的细胞膜。方法是在培养基中添加青霉素。 4、环境因素引起的谷氨酸发酵的代谢 转换 五、谷氨酸发酵的工艺控制 1. 菌龄及接种量的控制 一般情况下，一级种子菌龄控制在11～12h，二级种子菌龄控制在7～8h 接种量0.6％～1.7％。发酵培养基成份不同，谷氨酸菌种种类性质、种龄不同，所用接种量也不同，应根据实际情况和实验情况具体确定。一般以1%为好。 2. 温度的控制 前期32±0.6℃，后期可提高到34～37℃。谷氨酸发酵前期，主要是长菌阶段，如果温度过高，菌种易衰老，严重影响菌体生长繁殖。因此，温度控制在谷氨酸最适生长温度32℃左右。在发酵后期，菌体生长基本结束，为了满足大量生成谷氨酸，可适当提高温度，控制在34～37℃。 3. pH的控制 发酵前期如果pH偏低，则菌体生长旺盛，长菌而不产酸；如果pH偏高，则菌体生长缓慢，发酵时间拉长。在发酵前期将pH值控制在7.5～8.0左右较为合适，而在发酵中、后期将pH值控制在7.0～7.6左右对提高谷氨酸产量有利。通常采用氨水流加法和尿素流加法调节pH，这样同时也是添加氮源。 4. 通风量与搅拌速度的控制 在长菌阶段，若供氧过量，在生物素限量的情况下，抑制菌体生长，表现为耗糖慢，长菌慢，所以发酵前期以低通风量为宜。在发酵阶段，若供氧不足，发酵的主产物由谷氨酸变为乳酸，所以发酵中、后期以高通风量为宜。实际生产上，以气体转子流量计来检查通气量，即以每分钟单位体积的通气量表示通风强度。另外发酵罐大小不同，所需搅拌转速与通风量也不同。 11.4 谷氨酸的提取工艺 一、谷氨酸发酵液的性质 在发酵液中，除含谷氨酸外，还存在菌体、残糖、色素、胶体物质及其他发酵副产物。发酵结束后，发酵液的温度在34~36 ℃ ，pH为6.0~7.5，接近中性；发酵液外观呈浅黄色浆状，表面浮有少许泡沫。 二、谷氨酸的提取方法 谷氨酸的分离提纯主要根据它的两性电解质性质、溶解度、分子大小、吸附剂的作用及谷氨酸的成盐作用等，把它从发酵液中提取出来。 目前提取谷氨酸的常用方法有等电点法、离子交换法、锌盐法等。随着科技的进步，电渗析、反渗透、纳滤膜等这些新技术也应用到了谷氨酸的提取中。 1. 等电点法 等电点法是谷氨酸提取方法中最简单的一种，它具有操作简便、设备简单等优点，是目前谷氨酸生产多采用的方法。 （1）原理 谷氨酸分子中含有两个酸性羧基和一个碱性氨基，在酸性条件下，即pH＜3.22时，α-羧基的电离受抑制，谷氨酸主要以阳离子形式存在，带正电荷；当pH＞3.22时，谷氨酸主要以阴离子形式存在，带负电荷；当pH＝3.22时（即等电点pI），谷氨酸净电荷为零，呈电中性，而此时其溶解度最小，会从溶液中析出，通过过滤、离心等可提取出谷氨酸。 （2）谷氨酸的晶型及性质 谷氨酸晶体有两种，分别是α-型和β-型。前者为斜方六面体，晶轴长短接近，晶体粗壮，颗粒大，纯度高，易沉淀分离，是理想晶体。后者晶轴长短不一，针状或鳞片状，晶粒微细，不易沉淀析出，所以在操作中，需控制条件以利于形成α-型。