细胞生物学全套--第三节内质网技术报告.docVIP

第三节 内质网 1945年KR. Porter，A. Claude 和 EF. Fullam等人，观察培养的小鼠成纤维细胞时，发现细胞质内部具有网状结构，建议叫做内质网后来发现内质网，通常质膜核膜相连，并且与高尔基体关系密切，并且常伴有许多线粒体。 一、形态与组成 内质网膜* 约占细胞总膜面积的是真核细胞中最多的膜内质网是内膜构成的封闭的网状管道系统具有高度的多型性为粗面型内质网光面型内质网图6-21）RER呈扁平囊状，排列整齐，膜围成的空间称为ER腔膜外有核糖体附着SER呈分支管状小泡状无核糖体附着细胞不含纯粹的RER或SER它们分别是ER连续结构的一部分 ER主要功能是合成蛋白质脂类分泌性蛋白跨膜蛋白都是在ER中合成的ER合成的脂类除满足自身需要外还供给高尔基体、溶酶体、质膜、线粒体、叶绿体等膜性细胞结构 ER膜中含大约60%的蛋白40%的脂类脂类主要成分为磷脂磷脂酰胆碱含量较高鞘磷脂含量较少没有很少含胆固醇ER约有30多种膜结合蛋白另有30多种位于内质网腔这些蛋白的分布具有异质性如：葡糖-6-磷酸酶，普遍存在于内质网被认为是标志酶核糖体结合糖蛋白只分布在RERP450酶系只分布在SER 图6-20 RER的形态 图6-21 SER的形态 引自http://www.uni-mainz.de/二、RER的功能 （一）蛋白质合成 蛋白质都在核糖体上合成的起始于细胞质基质有些蛋白质在合成开始不久后转内质网上合成蛋白质主要有细胞外分泌的蛋白、如抗体、激素跨膜蛋白需要与其它细胞组严格分开的酶如溶酶体的各种水解酶需要进行修饰的蛋白，如糖蛋白 C. Milstein（1972）发现从骨髓瘤细胞提取的免疫球蛋白分子N端分泌到细胞外的N端G. Blobel和D. Sabatini等* 根据进一步的实验，提出了信号假说认为蛋白质上的信号肽，指导蛋白质转至内质网上合成Blobel因此获1999年诺贝尔生理医学奖。 蛋白质→内质网合成至少涉及5种成分： ① 信号肽引导新合成肽链内质网上的一段多肽位于新合成肽链的N端一般16~30个氨基酸残基含有6-15个带正电荷的非极性氨基酸信号肽是引导肽链进入内质网腔又称开始转移序列 ② 信号识别颗粒（SRP）由6种结构不同的多肽组成结合个7S RNA，分子量325KD属于一种核糖核蛋白SRP与信号结合，导致蛋白质合成暂停 ③ SRP受体膜整合蛋白，为异二聚体蛋白存在于内质网上，可与SRP特异结合 ④ 停止转移序列肽链上的一段特殊序列与内质网膜的亲合力很高能阻止肽链继续进入内质网腔使其成为跨膜蛋白质 ⑤ 转位因子由3-4个Sec61蛋白复合体构成的一个类似炸面圈的结构每个Sec61蛋白由条肽链组成蛋白质转入内质网合成的过程： 信号肽与SRP结合肽链延伸终止SRP与SRP受体结合SRP脱离信号肽肽链在内质网上继续合成信号肽引导新生肽链进入内质网腔信号肽切除肽链延伸至终止翻译体系解散这种肽链边合成边向内质网腔转移的方式，称为co-translation（图6-22）。 图6-22 蛋白质转移到内质网上合成的过程表3 一些信号肽序列 蛋白质 信号序列 Preproalbumin Met-Lys-Trp-Val-Thr-Phe-Leu-Leu-Leu-Leu- Phe-Ile-Ser- Gly-Ser-Ala-Phe-Ser↓Arg．．． Pre-IgG light chain Met-Asp-Met-Arg-Ala-Pro-Ala-Gln-Ile-Phe- Gly-Phe-Leu- Leu-Leu-Leu-Phe-Pro-Gly- Thr-Arg-Cys↓Asp．．． Prelysozyme Met-Arg-Ser-Leu-Leu-Ile-Leu-Val-Leu-Cys- Phe-Leu- Pro-Leu-Ala-Ala-Leu-Gly↓Lys．．． （二）蛋白质的修饰与加工 蛋白质的修饰与加工包括糖基化、羟基化、酰基化、二硫键形成等最主要的是糖基化几乎所有内质网上合成的蛋白质最终被糖基化糖基化的作用是：① 使蛋白质能够抵抗消化酶的作用② 赋予蛋白质传导信号的功能③ 某些蛋白只有在糖基化之后才能正确折叠糖基一般连接在4种氨基酸上，分为2： O-连接的糖基化与Ser、Thr和的OH连接连接的糖为半乳糖N-乙酰半乳糖胺在高尔基体上进行O-连接的糖基化 N-连接的糖基化：与天冬酰胺残基的NH2连接，糖为N-乙酰葡糖胺（图6-23）。 ? 图4-6 糖脂的结构 内质网上进行N-连接的糖基化糖的供体为核苷糖如CMP-唾液酸、GDP-甘露糖、UDP-N-乙酰葡糖胺等糖分子首先被糖基转移酶转移到膜上，装配成寡糖链再被寡糖转移酶转到新合成肽链特定序列（Asn-X-Ser或Asn-X-Thr）的天冬酰胺残基上。 图6-23