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土壤中分解尿素的细菌的分离和记数1》(课件).ppt
C 5.使用选择培养基的目的是( ) A.培养细菌 B.培养真菌 C.使需要的微生物大量繁殖 D.表现某微生物的特定性状与其他微生物加以区别 c 为培养和分离出酵母菌并淘汰杂菌,常在培养基中加入( ) A.较多的氮源物质 B.较多的碳源物质 C.青霉素类药物 D.高浓度食盐 1.要将从土壤中提取的自生固氮菌与其他的细菌分离出来,应将它们接种在( ) A.加入氮源和杀菌剂的培养基上 B.不加入氮源和加杀菌剂的培养基上C.加入氮源,不加杀菌剂的培养基上 D.不含氮源和杀菌剂的培养基上 D 做一做 2.将圆褐固氮菌接种到彻底灭菌的固体培养基上,经过一段时间培养,就能够得到( )A.菌丝 B.无一定形态的群体 C.单个细菌 D.菌落 D 3.在接种操作的过程中,不正确的是( )A.要将接种环灼烧灭菌 B.取下棉塞后要将试管口灼烧灭菌C.将接种环伸入试管内,先接触长菌多的部位 D.接种后还要将管口灭菌加塞 C 4.高压蒸气灭菌的原理是( )A.高压使细菌DNA变性 B.高温使细菌蛋白质凝固变性 C.高温烫死细菌 D.高温使细菌DNA变性 B 湖南长郡卫星远程学校 2009年上学期 制作 03 之后讲课本P22的最上面内容 土壤中分解尿素的细菌的分离与记数 3、常见的分解尿素的微生物 芽孢杆菌、小球菌、假单胞杆菌、克氏杆菌、棒状杆菌、梭状芽孢杆菌,某些真菌和放线菌也能分解尿素。 4、课题目的 ①从土壤中分离出能够分解尿素的细菌 ②统计每克土壤样品中究竟含有多少这样的细菌 一.研究思路 ㈠.筛选菌株 ㈡.统计菌落数目 ㈢.设置对照 水生耐热细菌Taq ( Thermus aquaticus ) 耐高温的Taq DNA聚合酶 美国微生物学科布鲁克(T.Brock) 1966年发现耐热细菌 研究思路 (一)筛选菌株 尿素分子的立体结构 CO(NH2)2+H2O CO2+2NH3 脲 酶 分解尿素的细菌: 要分离一种微生物,必须根据该微生物的特点,包括营养、生理、生长条件等;配置合适的培养基 方法: ⑴抑制大多数微生物生长 ⑵造成有利于该菌生长的环境, 结果:培养一定时间后,该菌数量上升,再通过稀释涂布平板法等方法对它进行纯化培养分离。 2、实验室中微生物的筛选原理: 人为提供有利于目的菌株生长的条件(包括营养、温度、pH等),同时抑制或阻止其他微生物生长。 15.0g 琼脂 1.0g 尿素 10.0g 葡萄糖 0.2g MgSO4`7H2O 2.1g NaH2PO4 1.4g KH2PO4 3、土壤中分解尿素的细菌的分离与计数所需培养基: ①从物理性质看此培养基属于哪类?从功能上属于哪类培养基? 固体培养基 ②在此培养基中哪些作为碳源、氮源? 碳源:葡萄糖、尿素 氮源:尿素 选择培养基 培养基的氮源为尿素,只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素,以尿素作为氮源。缺乏脲酶的微生物由于不能分解尿素,缺乏氮源而不能生长发育繁殖,而受到抑制,所以用此培养基就能够选择出分解尿素的微生物。 4、培养基选择分解尿素的微生物的原理 选择培养基:在微生物学中,将允许特定种类的微生物生长,同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基。 培养基配方 KH2PO4 1.4g Na2HPO4 2.1g MgSO4·7H2O 0.2g 葡萄糖 10.0g 尿素 1.0g 琼脂 15.0g 将上述物质溶解后,用蒸馏水定容至1000mL 在微生物学中,将允许特定种类的微生物生长,同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基。 选择培养基 选择培养基:从微生物群中选择具有特定表型的细胞.使之进行繁殖所用的培养基,称为选择培养基. 加入青霉素的培养基: 分离酵母菌、霉菌等真菌 加入高浓度食盐的培养基: 分离金黄色葡萄球菌 不加氮源的无氮培养基: 分离固氮菌 不加含碳有机物的无碳培养基: 分离自养型微生物 背景知识 测定微生物数量的方法: 1.直接计数法: 最常用显微镜直接计数法。 测定微生物数量的方法: 背景知识 1.直接计数法: 最常用显微镜直接计数法。 先将待测样品制成悬液,然后取一定量的悬液放在显微镜下进行计数。根据在显微镜下观察到的微生物数目来计算出单位体积内的微生物总数。 测定微生物数量的方法: 背景知识 1、显微镜直接计数: 不能区分死菌与活菌; 不适于对
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