第章细菌和病毒的遗传资料.ppt

第三节 噬菌体的遗传分析 一、烈性噬菌体 二、温和噬菌体 三、转导 噬菌体的遗传分析 遗传学上应用最广泛的是大肠杆菌的T噬菌体系列(T1到T7)。 T偶列噬菌体具有六角形的头部，其内含有双链DNA分子。头下的尾部包括一个中空的针状结构及外鞘。末端是基板，由尾丝及尾针组成。通过尾鞘的收缩将噬菌体DNA经中空尾部注入宿主细胞。 根据噬菌体DNA在宿主细菌内的特点，又将噬菌体分为两类。 一、烈性噬菌体 噬菌体的遗传物质经中空尾部进入宿主细胞，遂即破坏宿主细胞原有的遗传物质，并转而合成大量的噬菌体遗传物质和蛋白质，组装成许多新的子噬菌体，最后使细菌裂解(lysis)。 二、温和噬菌体 温和性噬菌体具有溶源性(lysogeny)的生活周期，即在噬菌体侵入后，细菌并不裂解，它们以两种不同形式出现，λ和P1噬菌体各代表一种略有不同的溶原性类型。 λ噬菌体附着于大肠杆菌染色体的gal和bio位点之间的attλ座位上(attachment site)，它能通过交换而整合到细菌染色体上。这时它会阻止其他λ噬菌体的超数感染(superinfection) (一个细菌受一个以上噬菌体所感染的现象)。整合的噬菌体称为原噬菌体(prophage)。 P1噬菌体与λ不同，它并不整合到细菌的染色体上，而是独立地存在于它的细胞质内。 温和噬菌体 温和噬菌体 这两种噬菌体的共同特点是核酸既不大量的复制，也不大量的转录和翻译。 这类噬菌体往往只有一个或少数基因表达，由此产生的阻遏物能关闭其他基因的表达。当溶源性细菌分裂成两个子细胞时，噬菌体λ随细菌染色体的复制而复制，每个子细胞中有一个拷贝。 噬菌体P1的复制则使每个子细胞中至少含有一个拷贝。原噬菌体通过诱导(induction)可转变为烈性噬菌体。 诱导可以通过不同的方式进行，如UV照射、温度改变、与非溶源性细菌的接合等。这类诱导可以造成阻遏物失活或稀释，使其他的噬菌体基因表达出来，促使噬菌体繁殖并进入裂解周期。 三、转导(transduction) 转导(transduction)是指以噬菌体为媒介所进行的细菌遗传物质重组的过程。 它与上述的转化、性导、接合的主要不同之处，在于它是以噬菌体为媒介的。在这一过程中，细菌的一段染色体被错误地包装在噬菌体的蛋白质外壳内，并通过感染而转移到另一个受体细菌内。 黎德伯格等在鼠伤寒沙门氏菌中发现转导现象。 用两个营养缺陷型杂交，一个不能合成苯丙氨酸、色氨酸和酪氨酸(phe- 、trp- 、tryr- ),另一个不能合成甲硫氨酸和组氨酸(met- 、his- )，结果在基本培养基上发现原养型的菌落。 为了确定是否发生了接合，将两种菌株分别放在U型管的两臂内，中间用玻璃滤板隔开，以防止细胞直接接触，但可以允许比细菌小的物质通过，竟然也获得了野生型重组型。 转导(transduction) 可能的结论是，这种重组是通过一种过滤性因子(filterable agent，FA)而实现的。由于FA不受DNA酶的影响，这样就消除了转化作用的可能性。 进一步研究证明，FA是一种噬菌体，称为P22，它对亲本菌株之一是溶源性的。支持这个结论的证据是：(1)FA的大小和质量与P22相同；(2)FA用抗P22血清处理后失活。 转导可分为普遍性转导(generalized transduction)和特殊性转导(specialized transduction)两大类。 转导(transduction) 转导(transduction) 普遍性转导  1.普遍性转导 在噬菌体感染的末期，细菌染色体被断裂成许多小片段，在形成噬菌体颗粒时，少数噬菌体将细菌的DNA误认做是它们自己的DNA，并以其外壳蛋白将其包围，从而形成转导噬菌体。由于可以转导细菌染色体组的任何不同部分，因此称为普遍性转导。 这种假噬菌体称为转导颗粒(transducing particle)。这种颗粒既然不携带噬菌体基因，对受体细菌就没有有害的影响。当转导颗粒将它的内含物注入受体细菌后，形成一个部分二倍体，导入的基因经过重组，整合到宿主的染色体上。 由此形成的具有重组遗传结构的细菌细胞叫做转导体(transductant)。 普遍性转导  两个基因同在一起转导称为合转导(cotransduction)，合转导的频率愈高，表明两个基因在染色体上的距离愈近，连锁愈密切；相反，如果两个基因的合转导频率很低，就说明它们之间距离较远。 通过观察两因子转导(two-factor transduction)，计算并比较每两个基因之间的合转导频率，就可以确定三个基因或三个以上基因在染色体上的排列顺序。 例如a基因和b基因的合转导频率很高，和c基因的合转导频率也很高，而b和c很少或完全不在一起转导，这三个基因的次序就应为bac