PCR技术及其应用(全)摘要.ppt

PCR的基本原理 PCR反应条件 PCR过程 PCR的特点 PCR的基本原理 PCR反应条件 PCR过程 PCR的特点 PCR的基本原理 PCR反应条件 PCR过程 PCR的特点 PCR的基本原理 PCR反应条件 PCR过程 PCR的特点 PCR的基本原理 PCR反应条件 PCR过程 PCR的特点 PCR的基本原理 PCR反应条件 PCR过程 PCR的特点 PCR的基本原理 PCR反应条件 PCR过程 PCR的特点 模板不纯 Buffer不合适 退火温度偏低 酶量过多 dNTP、Mg2+浓度偏高 循环次数过多 原因 对 策 纯化模板 更换Buffer 适当提高退火温度 适量用酶 适当降低dNTP和镁离子的浓度 减少循环次数 拖尾 6、PCR污染及防御措施 （1）潜在的污染源 患者、操作人员身体表面，实验室器材、试剂、仪器等。 （2）措施： 分区操作，经常消毒 做好器材、试剂的灭菌 使用一次性的Tip头、反应管 小量分装，避免相互污染 戴手套操作 器具专用 设立阳性对照和阴性对照 （3）污染源的处理 稀酸或84消毒液处理 紫外线照射 反应液污染的处理 7、RT-PCR中避免核糖核酸酶的污染 （1）外源RNase：戴口罩、手套；玻