第十六章 抗生素类药物分析-3要点.ppt

Yang Xin-Ji 第五节、高分子杂质的检查 生产过程 贮存过程 使用不当 高分子杂质（1000~5000Da） 内源性(药物自身聚合物 ) 外源性(蛋白、多肽、多糖及其与药物的结合物 ) 发酵过程 控制重点 抗原决定簇I （侧链） 抗原决定簇III （四氢噻唑环） 多肽碎片 与多肽碎片形成的新抗原决定簇II 第五节、高分子杂质的检查 1.基本结构 青霉素族 多肽（青霉素噻唑多肽） 聚合物 母核参于反应 侧链参于反应 头孢菌素族 与母核有关的N型聚合反应 侧链参与反应的L型聚合反应 仅与母核有关的青霉素聚合物结构（羧苄西林聚合物） 与侧链有关的青霉素聚合物结构（氨苄西林聚合物） 第五节、高分子杂质的检查 2.特点 （1）发酵中产生的任何蛋白及蛋白碎片均可带入产品中，相同的蛋白或蛋白碎片上可以结合不同数目的药物分子，形成青霉素噻唑多肽类杂质。 （2）有不同聚合度和不同机理聚合反应形成的聚合物，聚合物发生不同程度的降解作用。 （3）以异构体存在样品，同聚和异聚反应可同时发生。 （4）高分子杂质的种类、数量与生产工艺密切相关（溶媒结晶、喷雾干燥） 第五节、高分子杂质的检查 3.杂质控制方法 反相高效液相、离子交换色谱和凝胶色谱。 葡聚糖凝胶SephadexC－10 自身对照外标法 特定条件下，β–内酰胺类抗生素可以缔合成与高分 子杂质有相似色谱行为的的缔合物，即在Kav=0处表 现为单一的色谱峰。 以药物自身为对照品，测定其在特定条件下缔合时的 峰响应指标，然后改变色谱条件，测定样品，记录样 品色谱图中Kav=0处的高分子杂质峰的响应指标，按 外标法计算，即得样品中高分子杂质相当于药物本身 的相对含量 第五节、高分子杂质的检查 3.杂质控制方法 高分子杂质的分析方法： 1、蓝色葡聚糖在分离系统中的理论塔板数2500/m,拖尾因子在0.75~1.5； 2、缔合物峰面积的相对标准差（RSD）5% 头孢他啶中聚合物测定-----色谱条件与系统适用性试验 葡聚糖凝胶G-10 理论板数应不低于500， 拖尾因子在均应小于2.0 254nm 检 测 流动相A： 含3.5%硫酸铵 的pH7.0的0.1mol/L 磷酸盐缓冲液 蓝色葡聚糖 2000 流动相B： 水 头孢他啶中聚合物测定-----------色谱条件与系统适用性试验 保留时间比值0.93~1.07之间 峰面积的RSD应小于5.0% 254nm 检 测 头孢他啶 对照品溶液0.1mg/ml 流动相B： 水 流动相A： 含3.5%硫酸铵 的pH7.0的0.1mol/L 磷酸盐缓冲液 头孢他啶中聚合物测定-------测定法 葡聚糖凝胶G-10 254nm 检 测 流动相A： 含3.5%硫酸铵 的0.1mol/L 磷酸盐缓冲液 头孢他啶样品 （20mg/ml） 外标法计算，本品含头孢他啶聚合物以头孢他啶计不得超过0.3% AS 头孢他啶中聚合物测定-----------测定法 葡聚糖凝胶G-10 254nm 检 测 流动相B： 水 头孢他啶 对照品溶液 AR 外标法计算，本品含头孢他啶聚合物以头孢他啶计不得超过0.3% 萄聚糖凝胶 立体网状结构图 原理——“分子筛” 第五节、高分子杂质的检查 第十一章 复习内容 1. 熟悉抗生素类药物分析的特点及其 常规检验项目。了解抗生素类药物 的分析现状，熟悉生物学法与物理 化学法测定效价的原理及优缺点。 2. 掌握β－内酰胺类抗生素的结构、 性质、鉴别及含量测定。 3. 掌握氨基糖苷类抗生素的结构、性 质及鉴别，了解其检查及含量测定 4. 掌握四环素类抗生素的结构及性质，了解其鉴别、检查及含量测定 5. 了解抗生素类药物的质量考察方法 99：89．下列哪个药物会发生羟肟酸 铁反应 A. 青霉素 B. 庆大霉素 C. 红霉素 D. 链霉素 E. 维生素C 99m：71．中国药典(2010年版)测定头 孢菌素类药物的含量时，多 数采用的方法是 A. 微生物法 B. 碘量法 C. 汞量法 D. 正相高效液相色谱法 E. 反相高效液相色谱法 95：139．属于