检测生物组织中糖类、脂肪和蛋白质课件要点.ppt

一.实验原理： 某些化学试剂能够使生物组织中的有关有机化合物产生特定的颜色反应。如： ①.还原性糖的鉴定： 还原性糖+ ②.脂肪的鉴定： 　　　 脂肪+ ③.蛋白质的鉴定： 蛋白质+ ④淀粉的鉴定： 淀 粉 + 斐林试剂 砖红色沉淀 苏丹Ⅲ 橘黄色 双缩脲试剂 紫色 碘 蓝色 二.目的要求： 尝试用化学试剂检测生物组织中糖类、脂肪和蛋白质 1、还原糖的检测和观察： 选材 应该选择含 量高.颜色为 植物组织 以苹果.梨为最好。 糖 白色或近于白色 制备组织样液： 三.实验过程: 制浆：去皮、切块、研磨 过滤：（用单层纱布） 取液：（２mL） 可溶性还原糖与斐林试剂在加热的过程中生成砖红色沉淀，说明植物组织样液中含有还原糖。 注入2mL苹果组织样液 注入1mL刚配制好的斐林试剂 水浴加热约2min 检测步骤 变成砖红色 50----650C的温水 结论： 甲乙液等量混匀 振荡、混合摇匀呈现蓝色 ①还原糖有 。 ②试剂： . （甲液：0.1g/ml 的 , 乙液：0.05g/ml的 .） 甲乙液必须 后再加入样 液中， 。 ③必须 。 葡萄糖，果糖，麦芽糖 用水浴加热 斐林试剂 NaOH CuSO4 等量混合均匀 现配现用 注意事项： ④颜色变化： 浅蓝色 棕色 砖红色 2、脂肪的检测和观察： 圆形小颗粒呈橘黄色，说明有脂肪存在。 方法：待测组织样液+苏丹Ⅲ染液→橘黄色 取材： 花生种子(浸泡3～4h），将子叶削成薄片 制片 ①取最理想的薄片 ②在薄片上滴苏丹Ⅲ染液（2～3min） ③去浮色（用50﹪酒精） ④ 制成临时装片 观察 低倍镜下寻找到已着色的圆形小颗粒， 然后用高倍镜观察 结论： 注意事项： ①切片要薄，如厚薄不均就会导致观察时有的地方清晰有的地方模糊。 ②酒精的作用是： 。 ③需使用显微镜观察 ④ 使用不同的染色剂染色时间不同， 颜色变化： 。 洗去浮色 橘黄色或红色 3、蛋白质的检测和观察： 选材 应该选择含 丰富的豆浆或鸡 蛋清溶液。（避免材料自身的颜色对 实验变化颜色的掩盖） 蛋白质 黄豆浆滤液或蛋清稀释液 制备组织样液 呈色反应 组织样液2mL 双缩脲试剂A液1mL 双缩脲试剂B液4滴 摇匀后变成紫色 结论： 说明组织样液中存在蛋白质。 （3）注意事项： ①试剂： （A液：0.1g/ml的 ； B液： 0.01g/ml的 ） 先加 ，再加 。 B液要求量适中，否则多余的B液将会与A液发生反应生成Cu（OH）2显色而遮盖原有的颜色。 ② 鉴定前，留出一部分组织样液，以便对比 双缩脲试剂 A液1ml B液4滴 NaOH ③用于蛋白质鉴定的蛋清必须稀释，以免 实验后粘住试管壁，不易洗刷 CuSO4 斐林试剂与双缩脲试剂的比较： A液:0.1g/mLNaOH B液:0.01g/mLCuSO4 甲液:0.1g/mLNaOH 乙液:0.05g/mLCuSO4 紫色物质生成 砖红色沉淀 先加A液，再加B液，不需加热 甲液与乙液先混再用，且现配现用，需加热 蛋白质 还原性糖 试剂组成 检验结果 试剂用法 检测对象 双缩脲试剂 斐林试剂 问题探讨: 1、在做还原糖、蛋白质鉴定的实验时，为什么要留出一部分样液？ 作对照 2、使用双缩脲试剂时为什么B液只能加3～4滴而不能 过量？ 过量的双缩脲试剂B会与试剂A反应，使溶液呈蓝色，而掩盖生成的紫色。 3、为什么斐林试剂要现配现用，不能放置太久？ 时间太长，Cu(OH)2悬浊液就沉淀在试管底部而无法参与反应。 深化 3、淀粉的检测和观察： 取材：用刀背在新鲜的去