紫外分光光度法操作规程.docVIP

起 草： 日 期： 审 核： 日 期： 批 准： 日 期： 生效日期： 签 字： 拷 贝 号： 变更记载： 制定（变更）原因及目的： 修订号 批准日期 生效日期 00 01 02 分发部门 (档案存档1份) 生 产 部 [ ]份 计划供应室 [ ]份 质量部QA [ ]份 生 产 车 间 [ ]份 仓储管理室 [ ]份 质量部QC [ ]份 设 备 部 [ ]份 销售管理室 [ ]份 办 公 室 [ ]份 紫外分光光度法操作规程 适用范围：适用于本厂品种紫外分光光度法检验。 职责 QC检验员：严格按照操作规程进行检验。 QC主管：监督检查操作规程执行情况。 内容 紫外分光光度法是通过被测物质在在紫外光区的特定波长处或一定波长范围内的吸收度，对该物质进行定性分析和定量分析的方法。本法在药品检验中主要用于药品的鉴别、检查、含量测定。 3.1 紫外分光光度计的检定 3.1 波长准确度 3.1.1 波长准确度的允差范围 双光束光栅型紫外-可见分光光度计波长准确度允许误差为±0.5nm。单光束棱镜型350nm处±0.7nm，500nm处±2.0nm，700处±4.8nm。 3.1.2 波长准确度检定方法 用氧化钬玻璃检定 将氧化钬玻璃放入样品光路,参比光路为空气，按测定吸收光谱图方法测定。校正自动记录仪器时，应考虑记录仪的时间常数，测定样品与校正时取同一扫描速度。 氧化钬玻璃在279.4,287.5,333.7,360.9,418.7,460.0,484.5,536.2及637.5nm波长处有尖锐的吸收峰,可供波长检定用。氧化钬玻璃因制造的原因，每片氧化钬的吸收峰波长有差异，应使用经计量部门校验过的。 3.2 吸收度准确度 精密称取在120℃干燥至恒重的基准重铬酸钾约600mg，置1000ml量瓶中，用硫酸液（0.005mol/L）溶解并稀释至1000ml,用配对的1cm石英池,以硫酸液(0.005mol/l)为空白,在235,257,313,350nm分别测定吸收度,然后换算成，测得值应符合下表中规定的允差范围（±1%）。国际药典规定的允差变为±1%。 波长（nm） 吸收强度 吸收系数（） 允差范围 235 257 313 350 最小 最大 最小 最大 124.5 144.0 48.62 106.6 123.3-125.7 142.6-145.4 48.13-49.11 105.5-107.7 分辨率、杂散光、基线平直度、稳定度、绝缘电阻等项检定，按中华人民共和国国家计量检定规程JJG682-90《双光束紫外可见分光光度计检定规程》执行，并应符合有关项下的规定。日常常规测定主要是对以上两项时常检查。 3.3 样品测定操作方法 3.3.1 吸收系数测定（性状项下）按各该品种项下规定的方法配制供试品溶液，在规定的波长（参见5.8项）测定其吸收度，并计算吸收系数，应符合规定范围。 3.3.2 鉴别及检查按各该品种项下的规定，测定供试品溶液在有关波长处的最大及最小吸收，有的并须测定其各最大吸收峰值呀最大吸收与最小吸收的比值，均应符合规定。 3.3.3 含量测定 3.3.3.1 对照品比较法按各该品种项下规定的方法，分别配制供试品溶液和对照品溶液，对照品溶液中所含被测成分的量应为供试品溶液中被测成分标示量的（100±10）%以内，用同一溶剂，在规定的波长处测定供试品溶液和对照品溶液的吸收度。 3.3.3.2 吸收系数法按各该品种项下配制供试品溶液，在规定的波长±1nm处测定其吸收度，按各该p品种在规定条件下给出的吸收系数计算含量。 采用吸收系数法应对仪器进行校正后测定，如为测定新品种的吸收系数，需按“吸收系数测定法” 的规定进行。 3.3.3.3 进行光光度法采用计算分光光度未能的品种，应严格按各该品种项下规定的方法进行，用本法时应注意：有一些吸收度是在供试品或其成分吸收曲线的上升或下降陡坡部处测定，影响精度的因素较多，故应仔细操作，昼使测定供试品和对照品的条件一致，若该品种不用对照品，如维生素A测定法（见中国药典附录），则应在测定前对仪器作仔细的校正和检定。 3.4 注意事项 3.4.1 试验中所用的量瓶，移液管均应经检定校正、洗净后使用。 3.4.2 使用的石英吸收池必须洁净。用于盛装样品、参比及空白溶液的吸收池，当装入同一溶剂时，在规定波长测定吸收池的透光率，如透光率相差在0.3%以下者可配对使用，否则必须加以校正。 3.4.3 取吸收池时，手指拿毛玻璃面的两侧。装盛样品溶液以池体积的4/5