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分子生物学－中心法则 生物的遗传信息从 DNA传递给mRNA的过程称为转录。根据 mRNA链上的遗传信息合成蛋白质的过程，被称为翻译或表达。1958年Crick将生物 遗传信息的这种传递方式称为中心法则。 在某些情况下，RNA也可是遗传信息的携带者，如，RNA病毒能以自己的RNA为模板自我复制。某些致癌RNA病毒通过逆转录(reverse transcription)的方式将遗传信息传递给DNA。 第19章 DNA复制与修复 第一节 DNA复制概述 （一）复制方式：半保留复制。 物质基础：双螺旋结构 氮标记技术证实了DNA的半保留复制 以15NH4Cl为唯一氮源培养大肠杆菌，连续培养12代，使所有DNA标记上15N； 在普通培养基（14N)培养一代后，所有DNA密度介于14N ～15N之间； 培养两代后， 14N和14N ～15N杂合分子等量出现。 继续培养，14N分子增多。 第二节 原核生物DNA的复制 DNA的复制实际上就是以DNA为模板在DNA聚合酶作用下，将游离的四种脱氧三核苷酸(dATP,dGTP,dCTP,dTTP,简写为dNTP)聚合成DNA的过程。 这是一个非常复杂的酶促反应，需要许多种酶和蛋白质参与。 一、DNA聚合酶－复制的基本酶 作用特点：从引物游离3’－OH开始加入脱氧核苷酸，需要底物，引物，模板，能量，Mg2+。 DNA聚合酶为DNA指导的酶。 原核细胞DNA聚合酶519 三、DNA复制过程(521) 各种生物DNA的复制过程大同小异，大致包括以下几个阶段。 一）起始－形成复制叉，合成RNA引物 （1）有固定的起点 复制是从DNA分子上的特定部位开始的，这一部位叫做复制起始点(original replication)常用ori或o表示。多双向、对称等速复制。 大肠杆菌的ori C（515） 大肠杆菌染色体DNA复制起始点ori C由245bp组成，关键序列在于两组短的重复：三个13bp和四个9bp组成的保守序列，是大肠杆菌中DnaA蛋白识别的位置。 （2）DNA解旋，形成复制叉 DNA复制从起始点开始复制时，局部的DNA双链必须打开，主要靠解螺旋酶（helicase)的作用，打开后的单链还需要单链结合蛋白与其结合，防止复性。 在复制叉向前移动时造成前方DNA分子产生正超螺旋，必须由拓扑异构酶来解决。 二）、延伸－酶催化以高速度进行 在DNA聚合酶Ⅲ的催化下，根据模板链3’→5’的核苷酸顺序，从引物游离3’－OH开始加入脱氧核苷酸，直至合成整个DNA片断。 酶的催化方向：5’→3’，所以新生DNA链的延伸方向也是5’→3’。 两条链复制同时进行。如何解决？一条链连续合成，称为前导链；另一条链不连续合成，为滞后链。冈崎片断：以DNA 5’ → 3’链为模板时合成的不连续的较短的DNA片断。......不连续复制 复制过程：两条链同时进行 连接酶连接切口 三）、终止 两复制叉在终止区相遇，形成的连锁体由拓扑异构酶Ⅳ分开。终止子ter和终止蛋白Tus防止复制叉超过终止区过界复制。 四、DNA复制的保真性 DNA复制具有高保真的特点。 错误率1/109 ~1010。 1、碱基配对原则提供结构保障； 错误率1/104 ~105 2、DNA聚合酶催化反应的保真性； 3’→5’的外切校正功能。提高100-1000倍。 3、利用核苷酸代谢库调节系统和体内多种修复系统。 第三节 真核生物DNA的复制 真核DNA的合成的基本过程类似于原核DNA，不同之处： 多复制起点 至少有五种聚合酶αβγδε 端粒的复制依赖于端粒酶 （1）真核细胞多复制起点 （2）真核生物DNA聚合酶 真核生物至少拥有5种DNA聚合酶，分别命名为α、β、γ、δ及ε。能在5’→3’方向聚合DNA链，但功能不尽相同。 真核细胞中与DNA复制有关的酶是DNApolα（合成引物）和δ(合成前导链和滞后链）。δ还具有3’→5’外切酶的校正功能，并具有解螺旋的作用。 酶β和ε：参与修复。 酶γ参与线粒体DNA复制。 （3）端粒及端粒酶 真核生物染色体DNA是线性的，每复制一次，子链的5’有缺失。 3’端有特殊的序列,是线性DNA末端复制必需的 ---端粒 作用：稳定染色体 端粒酶（telomerase) ----防止端粒缩短的酶 组成 蛋白质(DNA聚合酶)+RNA(合成端粒DNA的模板) 唯一携带RNA模板的逆转录酶 人端粒酶: 模板(RNA-端粒酶):3’--（UCCCAA）n---5’ 合成(DNA): 5’--（AGGGTT）n---3’ 端粒酶和衰老、肿瘤有关 人的端粒与