侵袭性真菌感染药物的选择要点.ppt

Dr. YM Li 实验室诊断技术 Dr. YM Li 侵袭性念珠菌病的诊断仍然困难 无特异的临床特征 影像学表现：免疫功能低下、粒缺√/ICU？ 应用显微镜和培养液的传统分子生物学技术: 不敏感: 只有10-20%的能出现血液培养阳性 反馈时间长: 从血培养物的采集到阳性结果出来 (中位时间大约35个小时） 阳性结果出现到菌种种鉴定或药敏结果 (至少24-48个小时) 其他深层组织样本常常难以获得 Dr. YM Li 血清学检查 Galactomannan （GM）test 半乳甘露聚糖 曲霉细胞壁上一种抗原 IA活动时释放入血 可以从血清、脑脊、胸水、BALF检测到 I 0.5 抗原阴性 G--test 1-3-β-D-葡聚糖检测 存在于念珠菌、曲霉等的细胞壁中，能特异性激活G因子，从而激活鲎试验，此过程称为G试验。 应用范围：曲霉菌、念珠菌、镰刀霉、毛孢子菌、足分支菌 隐球菌、毛霉菌除外 Dr. YM Li GM测定在IA诊断中的应用—荟萃分析 1996 - 2005 年: 27项研究 galactomannan assay，折点：0.5 确诊患者中： 敏感性：0.71 (95%CI, 0.68–0.74) 特异性：0.89 (95% CI, 0.88–0.90 结论：在免疫抑制患者中GM测定 具有好的临床应用价值 所有研究中没有专门针对ICU患者的测定 Clinical Infectious Diseases 2006; 42:1417–27 Dr. YM Li 实验室诊断技术:(1?3)-?-D-葡聚糖 报道的敏感性:60-100%; 特异性:70-90% Obayashi et al. Lancet 1995;345:17-20; Odabasi et al. Clin Infect Dis 2004;39:199-205; Ostrosky-Zeichner et al. Clin Infect Dis 2005;41:654-9; Senn et al. Clin Infect Dis 2008;46:878-85 在存在细菌感染的危重患者中假阳性率 56-73% Digby et al. Clin Diag Lab Immunol 2003;10:882-5; Pickering et al. J Clin Microbiol 2005;43:5957-62 其他的葡聚糖来源 (如 血液透析 和其他的纤维素膜, 手术纱布等) Dr. YM Li PCR 发现念珠菌的 DNA 或者RNA: 直接从临床的样品中 从阳性血培养物中 检测低限: 100-101 cfu/mL 实验感染的人和动物: 与培养相比，其敏感性增加，阳性结果出现早 方法学标准化需要: 样品选择 DNA提取 选择目标 扩增方法 检测技术 Yeo Wong Clin Microbiol Rev 2002;15:465-84; Chen et al. Med Mycol 2002;40:333-57; Ellepola Morrison J Microbiol 2005 Dr. YM Li ICU 157 pts 527份标本 Stage 1 145 pts 515份标本 7.6% proven invasive Candida infection, 4.1% developed probable infection 88.3% unlikely infection Stage 2 12 pts proven infection 12份标本 RT--PCR Dr. YM Li 结 果 Conclusions. These data suggest that the described assays perform well in this population for enhancing the diagnosis of candidemia. The extent to which they may affect clinical outcomes, prescribing practice, and cost-effectiveness of care remains to be ascertained. Dr. YM Li Dr. YM Li * 多重荧光定量PCR的验证－－特异性 荧光定量PCR检测临床分离菌株结果 菌株种类 多重荧光定量PCR法结果 白色念珠菌 （n=18） 白色念珠菌 18/18 克柔念珠菌 （n=10） 克柔念珠菌 10/10 光滑念珠菌 （n=16） 光滑念珠菌