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Molecular Biology 李艳 liyan@seu.edu.cn 生物科学与医学工程学院 第一章 绪论 一、基本含义、原理 二、发展简史与展望 三、主要研究内容 四、参考书目信息 五、思考：科学家与科学 一、基本含义、原理 分子生物学的基本含义 从分子水平研究生命的本质 核酸、蛋白质等生物大分子的结构与功能 人类主动的改造和重组自然界的基础学科 分子生物学的基本原理 构成生物体各类有机大分子的单体在不同生物中都是相同的 生物体内一切有机大分子的构成都遵循共同的规则 某一特定生物体所拥有的核酸及蛋白质分子决定了它的属性 二、分子生物学发展简史 （一）准备和酝酿阶段 确定了蛋白质是生命的物质基础 确定了生命的遗传物质是DNA （二）建立和发展阶段 对DNA复制机理的逐渐认识 遗传信息传递中心法则的建立 （三）认识并开始改造生命的阶段 重组DNA技术、基因组研究、细胞信号转导机理研究…… （一）准备和酝酿阶段 确定了蛋白质是生命的物质基础 证明酶的本质是蛋白质：19世纪末Buchner第一次提出酶enzyme的名称，酶是生物催化剂；20世纪20-40年代提纯和结晶了一些酶，证明酶的本质是蛋白质。 1902年EmilFisher证明蛋白质结构是多肽； 40年代末，Sanger创立二硝基氟苯（DNFB）法、Edman发展异硫氰酸苯酯法分析肽链N端氨基酸； 1950年Pauling和Corey提出了α-角蛋白的α-螺旋结构模型。 1953年Sanger和Thompson完成了第一个多肽分子——胰岛素A链和B链的氨基酸全序列分析。 确定了生命的遗传物质是DNA 1868年F.Miescher就发现了核素（nuclein） 20世纪20-30年代已确认了自然界有DNA和RNA两类核酸，并阐明了核苷酸的组成。 1944年O.T.Avery等证明了肺炎球菌转化因子是DNA； 1952年A.D.Hershey和M.Cha-se用DNA35S和32P分别标记了T2噬菌体的蛋白质和核酸，感染大肠杆菌的实验进一步证明了核酸是遗传物质。 The transforming principle is DNA. The genetic material of phage T2 is DNA. （二）建立和发展阶段 对DNA复制机理的逐渐认识： 1953年Watson和Crick提出DNA双螺旋结构模型 1956年A.Kornbery首先发现DNA聚合酶 1958年Meselson及Stahl提出DNA半保留复制模型 1968年Okazaki(冈畸)提出DNA不连续复制模型； 1972年证实了DNA复制开始需要RNA作为引物； 70年代初获得DNA拓扑异构酶，并对真核DNA聚合酶特性做了分析研究 遗传信息传递中心法则的建立 1958年Weiss及Hurwitz等发现依赖于DNA的RNA聚合酶； 1961年Hall和Spiege-lman用RNA-DNA杂增色证明mRNA与DNA序列互补；逐步阐明了RNA转录合成的机理。 50年代初Zamecnik等发现微粒体（microsome）是细胞内蛋白质合成的部位； 1957年Hoagland、Zamecnik及Stephenson等分离出tRNA并对它们在合成蛋白质中转运氨基酸的功能提出了假设。 1961年Brenner及Gross等观察了在蛋白质合成过程中mRNA与核糖体的结合； 1965年Holley首次测出了酵母丙氨酸tRNA的一级结构； 在60年代Nirenberg、Ochoa以及Khorana等几组科学家的共同努力破译了RNA上编码合成蛋白质的遗传密码。 1970年Temin和Baltimore又同时从鸡肉瘤病毒颗粒中发现以RNA为模板合成DNA的反转录酶，又进一步补充和完善了遗传信息传递的中心法则。 （三）认识并开始改造生命的发展阶段 重组DNA技术的建立和发展 70年R.Yuan 和H.O.Smith发现限制性内切酶 72年Bery等将SV-40病毒DNA与噬菌体P22DNA在体外重组成功 77年Boyer等将人工合成的生长激素释放抑制因子基因重组入质粒 79年美国人工合成的人胰岛素基因重组转入大肠杆菌中合成人胰岛素 转基因动植物的成功 82年Palmiter等将克隆的生长激素基因导入小鼠 94年能比普通西红柿保鲜时间更长的转基因西红柿 96年转基因玉米、转基因大豆相继投入商品生产 我国将蛋白酶抑制剂基因转入棉花获得抗棉铃虫的棉花株 分子生物学进展 ? ? ? ? Nature：microRNA最初形成时的作用(2010-3-2)专题：Nature报道最近的研究工作表明，微RNA（普遍存在的小型非编码遗传元素，具有重要调控作用）在多细胞动物复杂性的演化中起