09微生物第7章2004(12-14)技术分析.pptVIP

第7章 微生物的生长繁殖与生存因子 第7章 微生物的生长繁殖及其控制 第一节 微生物的生长繁殖 第二节 微生物的生存因子 第三节 其他因子对微生物的影响 第四节 微生物与微生物之间的关系 第五节 菌种的退化、复壮、保藏 第一节 微生物的生长繁殖 一、微生物的生长、发育、繁殖 二、研究微生物的方法：1、分批培养 2、连续培养 三、生长曲线在污（废）水处理中的应用 一、生长与繁殖 个体生长→个体繁殖→群体生长 群体生长=个体生长+个体繁殖 二、1分批培养单批培养(batch culture) 或密闭培养(closed culture ) 1.1）细菌分批培养的生长曲线及时期划分 停滞期、对数期、静止期（稳定期）、衰亡期 1.2）世代时间及求解 Laboratory process developmentShake Flask Experiments Fermentation process: Continuous process 1.1分批培养生长曲线 (一)延滞期(lag phase) 又称停滞期、调整期或适应期。指少量微生物接种到新培养液中后，在开始培养的一段时间内细胞数目不断增加的时期。 该时期有几个特点： ①生长速率常数等于零。②细胞形态增长或变大，许多杆菌可长成丝状，例如Bacillus megaterium（巨大芽孢杆菌）在接种的当时细胞长为3.4μm，培养至3.5小时，其长为9.1μm，至5.5小时时，竟可达到19.8μm ③细胞内RNA尤其是rRNA含量增高，原生质嗜碱性。④合成代谢活跃，核糖体、酶类和ATP的合成加快，易产生诱导酶。⑤对外界不良条件如NaCl溶液浓度、温度和抗生素等化学药物的反映敏感。 影响延滞期长短的因素 接种龄：稳定期、对数期 接种量： 培养基成分—丰富/单调 （二）指数期 （exponential phase）又称对数期（logarithmic phase） 指数期有以下几个特点： ①生长速率常数R最大，因而细胞每分裂一次所需的代时G（增代时间，generation time）或原生质增加一倍的所需的倍增时间（doubling time）最短； ②细胞进行平衡生长，菌体内各种成分最为均匀； ③酶系活跃，代谢旺盛。 世代时间 影响指数期微生物增代时间的因素 菌种（种子种类） 营养成分 营养物浓度 温度 （三）稳定期 （stationary phase） 又称恒定期或最高生长期，其特点是生长速率常数R等于0，即处于新繁殖的细胞数与衰亡的细胞数相等，或正生长与负生长相等的动态平衡之中。这时的菌体产量达到了最高点，而且菌体产量与营养物质的消耗间呈现出一定的比例关系，这一关系就是生长产量常数Y（或称生长得率，growth yield） 在稳定期时 ，细胞开始贮存糖原、异染颗粒和脂肪等贮藏物；多数芽孢杆菌在这时开始形成芽孢；有的微生物在稳定期时还开始合成抗生素等次生代谢产物。 稳定期到来的原因主要是： ①营养物尤其是生长限制因子的耗尽； ②营养物的比例失调，例如C/N比值不合适等； ③酸、醇、毒素或H2O2等有害代谢产物的累积； ④PH、氧化还原势等物化条件越来越不适宜等。 稳定期的应用 稳定期是以生产菌体或与菌体生长相平行的代谢产物，例如单细胞蛋白、乳酸等为目的的一些发酵生产的最佳收获期，也是对某些生长因子例如维生素和氨基酸等进行生物测定的必要前提。此外，由于对稳定期到来的原因进行研究，还促进了连续培养技术的设计和研究。 （四）衰亡期 （decline phase 或 death phase） 在衰亡期中，个体死亡的速度超过新生的速度，因此，整个群体就呈现出负生长（R为负值）。 这时，细胞形态多样，例如会产生很多膨大、不规则的退化形态；有的微生物因蛋白水解酶活力的增强就发生自溶（autolysis）； 有的微生物在这时产生或释放对人类有用的抗生素等次生代谢产物； 在芽孢杆菌中，芽孢释放往往也发生在这一时期。 接种量对延滞期的影响 2、连续培养（continuous culture) 又称开放培养(open culture) 1）恒浊培养—菌液 浓度恒定不变，收获菌体或产物 2）恒化培养—营养成分浓度恒定不变—反应低于最大生长速率的条件下生长繁殖 返回上 分批培养与连续培养 三、生长曲线在污（废）水处理中的应用 1）、对数期—较高浓度有机废水 2）、静止期—常规活性污泥法、生物膜法 3）、衰亡期—延时曝气 返回上 恒浊与恒化的区别 第二节 微生物的生存因子 一、温度-消毒（巴斯德）；灭菌-干热及湿热 二、PH—缓冲剂 三、溶解氧 四、渗透压