07-核酸代谢技术分析.ppt

16S rRNA扩增电泳图 总 结 从头合成、补救途径、半保留复制、操纵子 DNA半不连续复制的步骤？ RNA合成的基本过程？ ?乳糖操纵子和色氨酸操纵子作用方式的异同？ * 2、反式作用因子 特异性转录因子：是个别基因转录所必需的转录因子，决定该基因表达的时间和空间特异性。 转录激活因子：通常是一些增强子结合蛋白。 转录抑制因子：是沉默子结合蛋白。 * 卵清蛋白基因产生mRNA的过程： 转录 1 2 3 4 5 6 7 A B C D E F G 卵清蛋白基因(7700个核苷酸) 1 2 3 4 5 6 7 A B C D E F G L L 5’ 3’ 加帽子和尾巴 1 2 3 4 5 6 7 A B C D E F G L 5’ 3’ 内含子RNA的除去 和拼接作用 12345 6 7 L CAP PolyA尾 成熟的mRNA 1872个核苷酸 * 1、真核生物mRNA的转录后加工 * 2、真核生物tRNA的转录后加工 ①由RNaseP（核酸内切酶）作用，从5’末端切除多余的核苷酸 ②由RNaseD（核酸外切酶）作用，从3’末端切除多余的核苷酸 ③在tRNA核苷酰转移酶的作用下，完成3’末端添加-CCA-序列 ④由核酸内切酶和连接酶共同完成剪接反应 ⑤完成碱基的甲基化、还原反应、脱氨基反应等化学修饰过程 * 2、真核生物tRNA的转录后加工 tRNA的生成 细胞核 核仁 细胞质 tRNA基因 转录 5’ 切断 tRNA前体 nCH3 假尿苷生成 tRNA * 酵母酪氨酸tRNA前体的加工 早转录本 成熟tRNA 加工 * 3、真核生物rRNA的转录后加工 18S 28S 5.8S 18S rRNA 5.8S和28S rRNA 1 2 3 4 转录 剪接 内含子 * 3、真核生物rRNA的转录后加工 18S 5.8S 28S 45S 甲基化作用 核酸内切酶 18S RNA 5.8S RNA 28S RNA 真核生物rRNA前体的加工 * 真核生物rRNA的生成与成熟 45S 5S 41S→32S 5S 20S 32S 5S 细胞核 核仁 细胞质 28S 5.8S 18S 5S 28S 5.8S 18S 核蛋白体 * P16S P23S P5S 16S 23S 5S 细菌rRNA的形成 * 四、RNA的复制 1、单链RNA病毒的复制 2、双链RNA病毒的复制 * 1、单链RNA病毒的复制 ＋ssRNA病毒：一旦病毒颗粒中的RNA进入寄主细胞，就直接作为mRNA，翻译出所编码的蛋白质，其中包括衣壳蛋白和病毒的RNA聚合酶。 例如脊髓灰质炎病毒、鼻病毒、烟草花叶病毒。 * 1、单链RNA病毒的复制 病毒正链（具mRNA功能） pppG 5 ’ 3 ’ OH 5 ’ 5 ’ p p 3 ’ OH 复制中间体 5 ’ 3 ’ 3 ’ 新合成的负链 病毒正链为模板 复制酶 5 ’ * 1、单链RNA病毒的复制 －ssRNA病毒：其复制是以ssRNA为负链，侵入寄主后不能直接作为mRNA，而是先以负链RNA为模板由转录酶转录出与负链RNA互补的RNA，再以这个互补RNA作为mRNA，翻译出遗传密码所决定的蛋白质。 例如流感病毒、莴苣坏死黄化病毒等。 * 2、双链RNA病毒的复制 病毒RNA聚合酶的作用下病毒基因组转录正链RNA，自髓核逸出。 它们既能作为mRNA，又能作为病毒基因组的模板。 mRNA翻译结构蛋白，装配内层衣壳后，再合成负链RNA。正链RNA进入，与之形成双链RNA。然后又重复上述过程，最后获得了外层衣壳。 * * 1 2 第四节 核酸代谢的调节 一、原核生物基因的转录调控 4 3 二、真核生物基因的转录调控 * 一、原核生物基因的转录调控 1、操纵子的概念和结构 2、乳糖操纵子 3、色氨酸操纵子 * 1、操纵子的概念和结构 操纵子：原核生物基因表达调控的功能单位，由启动子、调节基因、操纵基因和一个或多个功能相关的结构基因组成。 R P O Z Y A 操纵子 调节基因 启动子 操纵基因 结构基因 * 2、乳糖操纵子 大肠杆菌的乳糖操纵子是第一个被发现的操纵子